[发明专利]一种通过检测细胞模型中的TGF-β表达量评价冻干粉活性的方法在审
| 申请号： | 201710881653.9 | 申请日： | 2017-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN109554446A | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 董玲娟;明磊国;李晓宁 | 申请（专利权）人： | 东莞自然衡健康科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/02;C12N5/071 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 523808 广东省东莞市松山湖高新技术产业开*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明实施例提供一种通过检测细胞模型中TGF‑β表达量评价冻干粉活性的方法，涉及生物技术领域，解决了冻干粉活性评价的问题，克服了毛囊干细胞和毛乳头细胞不易分离，难培养的困扰，并且TGF‑β作为一种细胞因子来体外评价生发冻干粉的活性，其操作方法简单，实用性强，可作为后期不同批次冻干粉使用前活性评价的参考依据。该通过检测细胞模型中TGF‑β表达量评价冻干粉活性的方法为首先制备人源性ADSCs冻干粉，并分别将生长期的表皮干细胞和黑色素细胞胰酶消化后制备单细胞悬液，先后取两种细胞单细胞悬液混合培养构建表皮‑黑色素细胞模型，之后在此模型上给与冻干粉共培养，RT‑PCR方法进行TGF‑β的表达量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 冻干粉 细胞模型 表达量 单细胞悬液 黑色素细胞 活性评价 制备 检测 生物技术领域 表达量检测 表皮干细胞 毛囊干细胞 毛乳头细胞 参考依据 混合培养 体外评价 细胞因子 胰酶消化 人源性 表皮 构建 生发 细胞 | ||
【主权项】：
1.一种通过检测细胞模型中TGF‑β表达量评价冻干粉活性的方法，其特征在于，所述方法包括：（1）收集人源性脂肪间充质干细胞（ADSCs）的培养液，浓缩、冻干处理后制备成冻干粉；（2）分别将生长期的表皮细胞、黑色素细胞共培养后制备表皮‑黑色素细胞模型；（3）将权利要求（1）中的冻干粉以给药形式加入权利要求（2）中的表皮‑黑色素细胞模型中，放入培养箱中培养，培养时间为24h；（4）提取权利要求（3）中的细胞RNA，反转录，RT‑PCR进行TGF‑β表达量的检测；（5）以PCR检测获得的TGF‑β在mRNA水平的表达量变化评价冻干粉是否活性。
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