[发明专利]一种通过检测细胞模型中的TGF-β表达量评价冻干粉活性的方法在审
申请号: | 201710881653.9 | 申请日: | 2017-09-26 |
公开(公告)号: | CN109554446A | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
发明(设计)人: | 董玲娟;明磊国;李晓宁 | 申请(专利权)人: | 东莞自然衡健康科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12Q1/02;C12N5/071 |
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地址: | 523808 广东省东莞市松山湖高新技术产业开*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 冻干粉 细胞模型 表达量 单细胞悬液 黑色素细胞 活性评价 制备 检测 生物技术领域 表达量检测 表皮干细胞 毛囊干细胞 毛乳头细胞 参考依据 混合培养 体外评价 细胞因子 胰酶消化 人源性 表皮 构建 生发 细胞 | ||
1.一种通过检测细胞模型中TGF-β表达量评价冻干粉活性的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)收集人源性脂肪间充质干细胞(ADSCs)的培养液,浓缩、冻干处理后制备成冻干粉;
(2)分别将生长期的表皮细胞、黑色素细胞共培养后制备表皮-黑色素细胞模型;
(3)将权利要求(1)中的冻干粉以给药形式加入权利要求(2)中的表皮-黑色素细胞模型中,放入培养箱中培养,培养时间为24h;
(4)提取权利要求(3)中的细胞RNA,反转录,RT-PCR进行TGF-β表达量的检测;
(5)以PCR检测获得的TGF-β在mRNA水平的表达量变化评价冻干粉是否活性。
2.根据权利要求1所述的通过检测细胞模型中TGF-β表达量评价冻干粉活性的方法,其特征在于,所述(5)中的评价冻干粉活性,具体为:进行TGF-β检测的PCR检测实验重复验证至少三次,至少获得三次TGF-β表达量数据,且每次TGF-β表达量明显低于细胞模型对照组,且有显著性差异(p﹤0.05)时,判定冻干粉有促进毛发生长的活性。
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