[发明专利]一种通过毛囊干细胞体外增殖评价生发冻干粉活性的方法在审
申请号: | 201710880600.5 | 申请日: | 2017-09-26 |
公开(公告)号: | CN109554431A | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
发明(设计)人: | 董玲娟;明磊国;李晓宁 | 申请(专利权)人: | 东莞自然衡健康科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 523808 广东省东莞市松山湖高新技术产业开*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明实施例提供一种通过毛囊干细胞体外增殖评价生发冻干粉活性的方法,涉及生物技术领域,利用MTT检测方法作为体外评价生发冻干粉活性的标准,其操作方法简单,实用性强,可作为后期不同批次冻干粉使用前活性评价的参考依据,解决了生发冻干粉活性评价的问题,克服了批次间生发冻干粉活性检验的困扰。该通过毛囊干细胞体外增殖评价生发冻干粉活性的方法为首先制备人源性毛囊干细胞,并将生长期的毛囊干细胞胰酶消化后制备单细胞悬液,培养过夜之后给与生发冻干粉共培养,并设置不加冻干粉的细胞对照组,利用MTT方法进行吸光值的检测,获得生发冻干粉加入组与细胞对照组的吸光值,以此判定冻干粉的活性。 | ||
搜索关键词: | 冻干粉 生发 毛囊 增殖 毛囊干细胞 活性评价 细胞对照 吸光 制备 生物技术领域 单细胞悬液 参考依据 活性检验 体外评价 胰酶消化 人源性 判定 检测 | ||
【主权项】:
1.一种通过毛囊干细胞体外增殖评价生发冻干粉活性的方法,其特征在于,所述方法包括:(1)收集植发后剩余毛囊,原代分离培养后获得人源性毛囊干细胞(HFSCs);(2)分别将处于生长期的HFSCs消化后制备单细胞悬液,并于96孔板中培养过夜;(3)将待检测的生发冻干粉溶解于完全培养基中获得样品培养基,并测定其渗透压;将未加待检测生发冻干粉的培养基作为对照培养基,并调节渗透压等于样品培养基渗透压;(4)将权利要求(3)中的各培养基分别加入权利要求(2)中96孔板对应的孔板中,相同条件下进行培养;(5)对所获得的不同组别细胞进行MTT染色和吸光值检测,通过对比二者的吸光值,获得生发冻干粉加入组相对于细胞对照组的吸光值,以此判定冻干粉的活性。
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