[发明专利]多重扩增子测序用引物系统、其应用以及测序文库的构建方法有效
| 申请号： | 201710814297.9 | 申请日： | 2017-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN109486923B | 公开（公告）日： | 2022-02-18 |
| 发明（设计）人： | 罗景燕;唐毅;何广良;林钊;李伟琴;许少飞;赖炳权;周艳河 | 申请（专利权）人： | 广州永诺生物科技有限公司;广州永诺健康科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12N15/11;C40B50/06;C12N15/10 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 林青中;万志香 |
| 地址： | 510300 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种多重扩增子测序用引物系统、其应用及测序文库的构建方法。该引物系统包括第一轮反向特异性引物组和第二轮正向特异性引物组。其中第一轮反向特异性引物组包括多个不同的第一轮反向特异性引物，每个所述反向特异性引物从5’端至3’端分别为反向接头序列、条形码序列和反向特异性序列。分子条形码序列提供了一种很好的方法来跟踪错配，利用下游分析，聚合酶在PCR过程中产生的错配可以与原始分子中出现的序列变异区分开来，最后通过去除低水平的假阳性来提高1％或更低的突变的检测准确率。通过计算读数中唯一的分子条形码序列数量，而不是计算总读数的数量，也可以更好地实现目标量化，因为总读数更有可能被非均一性扩增的所误读。 | ||
| 搜索关键词： | 多重 扩增 子测序用 引物 系统 应用 以及 序文 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种多重扩增子测序用引物系统，其特征在于，包括第一轮反向特异性引物组和第二轮正向特异性引物组；其中，所述第一轮反向特异性引物组包括多个不同的第一轮反向特异性引物，每个所述反向特异性引物从5’端至3’端分别为反向接头序列、条形码序列和反向特异性序列，所述第一轮反向特异性引物组中的多个不同的第一轮反向特异性引物的条形码序列不同，且所述第一轮反向特异性引物组中的多个不同的第一轮反向特异性引物的反向特异性序列分别与待测目标区域的不同区段互补；所述第二轮正向特异性引物组包括多个不同的第二轮正向特异性引物，每个所述第二轮正向特异性引物从5’端至3’端分别为正向接头序列和正向特异性序列，所述第二轮正向特异性引物组中的多个不同的第二轮正向特异性引物的正向特异性序列分别与待测目标区域的不同区段互补。
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