[发明专利]一种人体免疫复合因子的制备方法及应用在审

专利信息
申请号: 201710741900.5 申请日: 2017-08-25
公开(公告)号: CN108354946A 公开(公告)日: 2018-08-03
发明(设计)人: 肖定璋 申请(专利权)人: 肖定璋
主分类号: A61K35/17 分类号: A61K35/17;A61K35/15;A61P35/00;A61P37/04;A61P39/06;A61K35/14
代理公司: 佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙) 44387 代理人: 颜春艳
地址: 510000 广东省广州*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明提出了一种人体免疫复合因子的制备方法,包括人外周血单个核细胞的分离、人外周血单个核细胞的培养与诱导、细胞的纯化除杂以及细胞的破碎和产物的提取。其作用机理是将外周血(包括脐血)中的单个核细胞(主要是淋巴细胞)培养扩增,在一定条件下诱导其产生有效的免疫复合因子,包括多肽及各种小分子物质,所以临床效果更明显,作用更全面。另外,由于排除了外源性细胞的输入,输入后不会引起发热、乏力、肌肉酸痛等副作用,所以安全性高,免疫功能更全面。本发明制备的单核细胞诱导冻融提取物,使用方便、易于保存和运输,可同时作为提高机体免疫力、抗衰老及治疗肿瘤等疾病的有效生物制剂。
搜索关键词: 复合因子 制备 人外周血单个核细胞 诱导 人体免疫 淋巴细胞 单个核细胞 机体免疫力 外源性细胞 小分子物质 细胞 单核细胞 肌肉酸痛 临床效果 免疫功能 有效生物 作用机理 抗衰老 提取物 外周血 除杂 冻融 多肽 扩增 脐血 发热 破碎 乏力 肿瘤 保存 疾病 治疗 运输 应用
【主权项】:
1.一种人体免疫复合因子的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:1)人外周血单个核细胞的分离:通过仪器单采或人工抽取人外周血,肝素抗凝处理及Ficoll密度梯度离心法分离得到单个核细胞;2)人外周血单个核细胞的培养与诱导:将所得的单个核细胞重悬并置于AIM‑V无血清培养基培养,调整细胞浓度为1×106个/mL,同时加入植物血凝素使得植物血凝素在体系中所占含量为10‑100ug/mL,继续置于37℃、5%的CO2孵箱中培养,以后隔日补加AIM‑V无血清培养液,培养5‑10天,使细胞浓度至少达到1×107个/mL,收获细胞;3)细胞的纯化除杂:将收获的细胞用生理盐水洗涤三次,以除去培养液中所有成分;4)细胞破碎和产物收集:在收集的细胞中加入生理盐水,将细胞稀释成2×106个/mL悬液,经超声粉碎并重复冻融裂解处理后,离心收集上清即为免疫复合因子,冷冻保藏即可。
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