[发明专利]一种荧光传感器的制备方法、一种检测酪氨酸酶的方法

摘要

本发明提供了一种荧光传感器的制备方法、一种检测酪氨酸酶的方法，与现有技术相比，本发明利用DNA 1和DNA 2碱基互补配对，DNA1和DNA2的DNA设计中，都包含一段含有30个T的碱基。该聚30T的碱基可以使Cu²⁺还原为Cu⁰，使之产生荧光。然后，加入抗坏血酸钠和硫酸铜，制备得到TTE DNA铜纳米粒子，具有荧光性能，利用酪氨酸酶可以快速有效的猝灭TTE DNA铜纳米粒子荧光的原理，来达到定量检测酪氨酸酶的目的。使用的试剂是低成本，不需要复杂的有机荧光化合物的合成，传感器设计过程非常简单，无需任何标记和修饰探针。检测准确度高、灵敏、检测限低。

主权项

1.一种荧光传感器检测酪氨酸酶的方法，其特征在于，检测方法为：向制备的荧光传感器中加入不同浓度的酪氨酸酶溶液，3min后用荧光仪记录体系的荧光强度，根据不同浓度的酪氨酸酶溶液猝灭TTE DNA铜纳米粒子程度不同，构建荧光强度与酪氨酸酶溶液的线性关系，即可定量检测酪氨酸酶；所述荧光传感器的制备方法包括以下步骤：1)DNA1和DNA2分别用缓冲溶液稀释，分别得到DNA1溶液和DNA2溶液，待用；2)混合稀释后的DNA1溶液和DNA2溶液，培养，使DNA1和DNA2碱基互补配对；3)培养结束后，加入抗坏血酸钠溶液和CuSO₄溶液，得到TTE DNA铜纳米粒子，荧光传感器制备完成；步骤1)中所述缓冲液为10mM MOPS(3‑(N‑吗啉基)丙磺酸)PH＝7.6的缓冲溶液；步骤1)中所述DNA1序列：GCAGAGTTGAGACCAT30TCAGAAGGCAAAAAA；DNA2序列：TTTTTTGCCTTCTGAT30TGGTCTCAACTCTGC。