[发明专利]用于检测6种呼吸道病毒的LAMP引物组合及其应用有效
| 申请号： | 201710251770.7 | 申请日： | 2017-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN106884012B | 公开（公告）日： | 2020-07-28 |
| 发明（设计）人： | 宋宏彬;王瑞丽;郝荣章;孔文;李杨;卢晓;孙明璇;赵荣涛 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军疾病预防控制所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/70;C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100071 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了用于检测6种呼吸道病毒的LAMP引物组合及其应用。本发明提供的引物组合，由序列1至序列36所示的36种DNA分子组成。所述引物组合可应用于检测待测病毒是否为甲型H1N1流感病毒、甲型H3N2流感病毒、H5N1禽流感病毒、H7N9禽流感病毒、乙型流感病毒或人腺病毒，可应用于检测待测样本中是否含有甲型H1N1流感病毒和/或甲型H3N2流感病毒和/或H5N1禽流感病毒和/或H7N9禽流感病毒和/或乙型流感病毒和/或人腺病毒。本发明提供的引物组合用于检测6种呼吸道病毒，具有高特异性和高灵敏度，可以实现简便、快速、准确检测。本发明具有重大的推广价值。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 检测 呼吸道 病毒 lamp 引物 组合 及其 应用 | ||
【主权项】：
引物组合，为如下(a1)或(a2)或(a3)：(a1)由引物组Ⅰ、引物组Ⅱ、引物组Ⅲ、引物组Ⅳ、引物组Ⅴ和引物组Ⅵ组成；(a2)由所述引物组Ⅰ、所述引物组Ⅱ、所述引物组Ⅲ、所述引物组Ⅳ、所述引物组Ⅴ和所述引物组Ⅵ中的任意两个、任意三个、任意四个或任意五个组成；(a3)所述引物组Ⅰ、所述引物组Ⅱ、所述引物组Ⅲ、所述引物组Ⅳ、所述引物组Ⅴ或所述引物组Ⅵ；所述引物组Ⅰ由H1N1‑F3、H1N1‑B3、H1N1‑FIP、H1N1‑BIP、H1N1‑LF和H1N1‑LB组成；所述H1N1‑F3为如下(b1)或(b2)：(b1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；(b2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；所述H1N1‑B3为如下(b3)或(b4)：(b3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；(b4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；所述H1N1‑FIP为如下(b5)或(b6)：(b5)序列表的序列3所示的单链DNA分子；(b6)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；所述H1N1‑BIP为如下(b7)或(b8)：(b7)序列表的序列4所示的单链DNA分子；(b8)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子；所述H1N1‑LF为如下(b9)或(b10)：(b9)序列表的序列5所示的单链DNA分子；(b10)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子；所述H1N1‑LB为如下(b11)或(b12)：(b11)序列表的序列6所示的单链DNA分子；(b12)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子；所述引物组Ⅱ由H3N2‑F3、H3N2‑B3、H3N2‑FIP、H3N2‑BIP、H3N2‑LF和H3N2‑LB组成；所述H3N2‑F3为如下(c1)或(c2)：(c1)序列表的序列7所示的单链DNA分子；(c2)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子；所述H3N2‑B3为如下(c3)或(c4)：(c3)序列表的序列8所示的单链DNA分子；(c4)将序列8经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列8具有相同功能的DNA分子；所述H3N2‑FIP为如下(c5)或(c6)：(c5)序列表的序列9所示的单链DNA分子；(c6)将序列9经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列9具有相同功能的DNA分子；所述H3N2‑BIP为如下(c7)或(c8)：(c7)序列表的序列10所示的单链DNA分子；(c8)将序列10经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列10具有相同功能的DNA分子；所述H3N2‑LF为如下(c9)或(c10)：(c9)序列表的序列11所示的单链DNA分子；(c10)将序列11经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列11具有相同功能的DNA分子；所述H3N2‑LB为如下(c11)或(c12)：(c11)序列表的序列12所示的单链DNA分子；(c12)将序列12经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列12具有相同功能的DNA分子；所述引物组Ⅲ由H5N1‑F3、H5N1‑B3、H5N1‑FIP、H5N1‑BIP、H5N1‑LF和H5N1‑LB组成；所述H5N1‑F3为如下(d1)或(d2)：(d1)序列表的序列13所示的单链DNA分子；(d2)将序列13经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列13具有相同功能的DNA分子；所述H5N1‑B3为如下(d3)或(d4)：(d3)序列表的序列14所示的单链DNA分子；(d4)将序列14经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列14具有相同功能的DNA分子；所述H5N1‑FIP为如下(d5)或(d6)：(d5)序列表的序列15所示的单链DNA分子；(d6)将序列15经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列15具有相同功能的DNA分子；所述H5N1‑BIP为如下(d7)或(d8)：(d7)序列表的序列16所示的单链DNA分子；(d8)将序列16经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列16具有相同功能的DNA分子；所述H5N1‑LF为如下(d9)或(d10)：(d9)序列表的序列17所示的单链DNA分子；(d10)将序列17经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列17具有相同功能的DNA分子；所述H5N1‑LB为如下(d11)或(d12)：(d11)序列表的序列18所示的单链DNA分子；(d12)将序列18经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列18具有相同功能的DNA分子；所述引物组Ⅳ由H7N9‑F3、H7N9‑B3、H7N9‑FIP、H7N9‑BIP、H7N9‑LF和H7N9‑LB组成；所述H7N9‑F3为如下(e1)或(e2)：(e1)序列表的序列19所示的单链DNA分子；(e2)将序列19经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列19具有相同功能的DNA分子；所述H7N9‑B3为如下(e3)或(e4)：(e3)序列表的序列20所示的单链DNA分子；(e4)将序列20经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列20具有相同功能的DNA分子；所述H7N9‑FIP为如下(e5)或(e6)：(e5)序列表的序列21所示的单链DNA分子；(e6)将序列21经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列21具有相同功能的DNA分子；所述H7N9‑BIP为如下(e7)或(e8)：(e7)序列表的序列22所示的单链DNA分子；(e8)将序列22经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列22具有相同功能的DNA分子；所述H7N9‑LF为如下(e9)或(e10)：(e9)序列表的序列23所示的单链DNA分子；(e10)将序列23经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列23具有相同功能的DNA分子；所述H7N9‑LB为如下(e11)或(e12)：(e11)序列表的序列24所示的单链DNA分子；(e12)将序列24经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列24具有相同功能的DNA分子；所述引物组Ⅴ由B‑F3、B‑B3、B‑FIP、B‑BIP、B‑LF和B‑LB组成；所述B‑F3为如下(f1)或(f2)：(f1)序列表的序列25所示的单链DNA分子；(f2)将序列25经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列25具有相同功能的DNA分子；所述B‑B3为如下(f3)或(f4)：(f3)序列表的序列26所示的单链DNA分子；(f4)将序列26经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列26具有相同功能的DNA分子；所述B‑FIP为如下(f5)或(f6)：(f5)序列表的序列27所示的单链DNA分子；(f6)将序列27经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列27具有相同功能的DNA分子；所述B‑BIP为如下(f7)或(f8)：(f7)序列表的序列28所示的单链DNA分子；(f8)将序列28经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列28具有相同功能的DNA分子；所述B‑LF为如下(f9)或(f10)：(f9)序列表的序列29所示的单链DNA分子；(f10)将序列29经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列29具有相同功能的DNA分子；所述B‑LB为如下(f11)或(f12)：(f11)序列表的序列30所示的单链DNA分子；(f12)将序列30经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列30具有相同功能的DNA分子；所述引物组Ⅵ由HAdV‑F3、HAdV‑B3、HAdV‑FIP、HAdV‑BIP、HAdV‑LF和HAdV‑LB组成；所述HAdV‑F3为如下(g1)或(g2)：(g1)序列表的序列31所示的单链DNA分子；(g2)将序列31经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列31具有相同功能的DNA分子；所述HAdV‑B3为如下(g3)或(g4)：(g3)序列表的序列32所示的单链DNA分子；(g4)将序列32经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列32具有相同功能的DNA分子；所述HAdV‑FIP为如下(g5)或(g6)：(g5)序列表的序列33所示的单链DNA分子；(g6)将序列33经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列33具有相同功能的DNA分子；所述HAdV‑BIP为如下(g7)或(g8)：(g7)序列表的序列34所示的单链DNA分子；(g8)将序列34经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列34具有相同功能的DNA分子；所述HAdV‑LF为如下(g9)或(g10)：(g9)序列表的序列35所示的单链DNA分子；(g10)将序列35经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列35具有相同功能的DNA分子；所述HAdV‑LB为如下(g11)或(g12)：(g11)序列表的序列36所示的单链DNA分子；(g12)将序列36经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列36具有相同功能的DNA分子。
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- 2022-05-13 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种脊髓灰质炎检测引物探针组合物及一体化微流控芯片试剂盒。采用本发明提供的引物探针组合物同时检测脊髓灰质炎，具有较好的灵敏度和准确度，扩增效率高，且操作简便，快速省时。本发明利用微流控芯片技术，通过集核酸提取、纯化、扩增和检测为一体的方式，解决病原体快速检测的问题，实现“样本进‑结果出”的POCT检测方案，取样后直接加入设备，纯化加扩增，60分钟内结果。
- 用于增加合成核糖核酸(RNA)的蛋白质表达的工程化表达构建体-202280016860.7
- K·穆萨维 - 里博兹有限责任公司
- 2022-02-25 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本公开涉及通过利用合成mRNA的5’和/或3’非翻译区(UTR)中的翻译增强元件增强细胞中的蛋白质表达。所述5’UTR包括启动子、微型增强子序列和Kozak序列，而所述3’UTR包括间隔区、茎环结构和任选的聚腺嘌呤尾。所述人工5’和3’UTR增加蛋白质表达，并且在某些实例中，不包括经修饰的核苷、微RNA位点或免疫逃避因子。
- 含有N-乙酰半乳糖胺的靶向配体-202380010110.3
- 黄金宇;郭洪利 - 大睿生物医药科技（上海）有限公司
- 2023-01-29 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本发明提供一种包含N‑乙酰半乳糖胺的配体，其中所述配体包含式(X’)所示的缀合基团以及含有该靶向配体的核酸分子。#imgabs0#
- 一种脑膜炎奈瑟菌检测引物探针组合物及一体化微流控芯片试剂盒-202210521995.0
- 肖利力;康洁;刘翌;金鑫浩;贾欣月;张瑜;高静;蔡亦梅;范东雨;任鲁风 - 北京中科生仪科技有限公司;北京璘客生物科技有限公司
- 2022-05-13 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种脑膜炎奈瑟菌检测引物探针组合物及一体化微流控芯片试剂盒。采用本发明提供的引物探针组合物检测脑膜炎奈瑟菌，具有较好的灵敏度和准确度，扩增效率高，且操作简便，快速省时。本发明利用微流控芯片技术，通过集核酸提取、纯化、扩增和检测为一体的方式，解决病原体快速检测的问题，实现“样本进‑结果出”的POCT检测方案，取样后直接加入设备，纯化加扩增，60分钟内出结果。
- 非环式苏氨醇核酸-202280017165.2
- 冈添隆;相川光介;渡边微香;冈本晃充;森广邦彦;影山泰一 - 国立大学法人东京大学;AGC株式会社
- 2022-03-03 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本发明提供细胞膜透过性优异的核酸。本发明涉及具有下述通式(A1)或(A2)[式中，R
- 一种肠出血性大肠杆菌核酸检测引物探针组合物及一体化微流控芯片试剂盒-202210537268.3
- 贾欣月;刘建礼;金鑫浩;康洁;高静;张瑜;蔡亦梅;范东雨;任鲁风 - 北京中科生仪科技有限公司;北京璘客生物科技有限公司
- 2022-05-13 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种肠出血性大肠杆菌核酸检测引物探针组合物及一体化微流控芯片试剂盒。采用本发明提供的引物探针组合物检测肠出血性大肠杆菌，具有较好的灵敏度和准确度，扩增效率高，且操作简便，快速省时。本发明利用一体化芯片上微流控的方式集成了核酸提取、纯化、扩增和检测，解决病原体快速检测的问题，实现“样本进‑结果出”的POCT检测方案，取样后直接加入设备，纯化加扩增，60分钟内出结果。
- 一种马亚罗病毒核酸检测引物探针组合物及一体化微流控芯片试剂盒-202210537220.2
- 肖利力;高静;刘建礼;康洁;金鑫浩;贾欣月;张瑜;蔡亦梅;范东雨;任鲁风 - 北京中科生仪科技有限公司;海关总署（北京）国际旅行卫生保健中心
- 2022-05-13 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种马亚罗病毒核酸检测引物探针组合物及一体化微流控芯片试剂盒。采用本发明提供的引物探针组合物检测马亚罗病毒，具有较好的灵敏度和准确度，扩增效率高，且操作简便，快速省时。本发明利用一体化芯片上微流控的方式集成了核酸提取、纯化、扩增和检测，解决病原体快速检测的问题，实现“样本进‑结果出”的POCT检测方案，取样后直接加入设备，纯化加扩增，60分钟内出结果。
- 一种用于检测HPV的液相杂交捕获探针、应用及其试剂盒-202210713963.0
- 余丽萍;汪彪;吴强;冀长泉;李晨 - 纳昂达（南京）生物科技有限公司
- 2022-06-22 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本发明提供了一种用于检测HPV的杂交捕获探针、方法及其试剂盒。设计覆盖多个亚型基因组的探针，其主要由探针之间互补配对的片段以及探针与靶区域互补配对的片段组成，探针的3’端或5’端有生物素修饰。该探针以病毒基因组为模板进行捕获，允许检测少于1个拷贝的病毒基因组，提高病原体检测效率，并实现单管探针中检测多个病毒亚型的目的，且可以用于检测HPV分型。本发明通过优化探针设计方案、杂交捕获系统，提高探针与靶区域的结合能力、微量靶标的杂交捕获效率，以及提升整体的覆盖均一性以及稳定性。
- DNA折纸框架脂质体及其制备方法-202110479913.6
- 晁洁;舒展逸;熊金鑫;欧阳李林 - 南京邮电大学
- 2021-04-30 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 本发明公开了一种DNA折纸框架脂质体及其制备方法，所述DNA折纸框架脂质体包括磷脂分子和DNA折纸框架，DNA折纸框架包括DNA圆环折纸和锚定在DNA圆环折纸上的脂化DNA，脂化DNA与磷脂分子结合，用于将磷脂分子固定在DNA折纸框架上。本发明的DNA折纸框架脂质体通过将脂化DNA锚定在DNA折纸框架上，再利用该DNA折纸框架将脂质体模板化，以实现所制备的DNA折纸框架脂质体的尺寸固定且具有良好的分散性；同时，DNA折纸框架具有优异的结构稳定性，以控制并推进脂质体的生长进程；进一步的，DNA折纸框架还具有生物相容性和可寻址性，通过在DNA折纸框架上设置多个脂化DNA以形成多个成核点，使磷脂分子自组装形成生物膜。
- 生物分子分析方法-201980100215.1
- 赤堀玲奈;后藤佑介;藤冈满;柳至 - 株式会社日立高新技术
- 2019-09-18 - 2023-10-20 - C12N15/11
- 更简便且切实地使生物分子在纳米孔内往复运动。一种衔接子分子，其与分析对象的生物分子直接或间接地结合，且具有由单链核苷酸构成的立体结构形成区域。
- 用于检测丙型肝炎病毒的RAA引物、试剂盒及其应用-202111415246.1
- 王爱萍;张改平;王海丽;张雨航;陈玉梅;周景明;张盈;朱习芳;梁超 - 郑州大学
- 2021-11-25 - 2023-10-17 - C12N15/11
- 本发明公开了一种用于检测丙型肝炎病毒的RAA引物、试剂盒及其应用。本发明筛选得到的HCV检测RAA引物特异性好、灵敏度高（最低可检测到10 copies/μL），能够用于制备HCV检测试剂盒及构建RAA扩增体系，并结合侧向流动层析技术实现对HCV快速、低成本的检测及可视化的结果判定，无需复杂的专业背景，使用过程方便快捷，检测结果安全可靠。
- 用于抑制血管生成素样3(ANGPTL3)蛋白表达的组合物和方法-202280016262.X
- 舒东旭;邵鹏程 - 上海舶望制药有限公司
- 2022-09-22 - 2023-10-13 - C12N15/11
- 提供了可用于降低血管生成素样3(ANGPTL3)基因的表达以及用于治疗ANGPTL3相关疾病和病症的组合物及方法。提供了可用于降低细胞和对象中ANGPTL3表达的ANGPTL3dsRNA药剂、ANGPTL3反义多核苷酸药剂、包含ANGPTL3dsRNA药剂的组合物、以及包含ANGPTL3反义多核苷酸药剂的组合物。
- 专利分类
