[发明专利]多核苷酸组装的组合物和方法在审
| 申请号： | 201680053423.7 | 申请日： | 2016-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN108026525A | 公开（公告）日： | 2018-05-11 |
| 发明（设计）人： | 詹姆斯·爱德华·约翰·菲尔德;哈里森·弗雷德里克·里克比 | 申请（专利权）人： | 天才实验室有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/64;C12N15/66 |
| 代理公司： | 北京志霖恒远知识产权代理事务所(普通合伙) 11435 | 代理人： | 陈姗姗;郭栋梁 |
| 地址： | 英国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明提供用于组装包含至少第一双链多核苷酸(DSP)和至少第二DSP以及任选地包含其他DSP的靶多核苷酸序列的方法。该方法包含组装反应，所述组装反应包括提供包含第一DSP的一条链的多核苷酸序列的第一单链多核苷酸(SSP)和包含第二DSP的一条链的多核苷酸序列的第二SSP，以及将SSP通过引物和聚合酶介导的延伸反应转换成双链形式的步骤。DSP包含与组装反应内的多核苷酸序列互补的多核苷酸序列，使得第一和第二以及其他DSP各自的排序和方向由独特的突出端配对确定。本发明还提供核酸库和构建该库的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 多核苷酸 组装 组合 方法 | ||
【主权项】：
1.一种组装包含至少第一双链多核苷酸DSP和第二DSP的靶多核苷酸序列的体外方法，所述方法包括组装反应，该组装反应包括以下步骤：(i)提供包含第一DSP的一条链的多核苷酸序列的第一单链多核苷酸SSP和包含第二DSP的一条链的多核苷酸序列的第二SSP；(ii)提供结合于第一SSP的末端的第一引物和结合于第二SSP末端的第二引物，并且通过聚合酶介导的第一和第二引物的延伸将第一SSP转化成第一DSP，将第二SSP转化成第二DSP，其中，第一DSP包含与第二DSP的多核苷酸序列互补的多核苷酸序列；(iii)通过形成包含互补多核苷酸序列的至少一部分的3'或5'突出端，在第一和第二DSP上各自产生单链多核苷酸的区域；和(iv)通过互补突出端的退火将第一DSP连接到第二DSP来组装靶多核苷酸序列，其中，第一和第二DSP各自的排序和方向由独特的突出端配对确定。
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