[发明专利]使用分裂循环扩增的小核酸定量在审
| 申请号： | 201680010576.3 | 申请日： | 2016-02-17 |
| 公开（公告）号： | CN107250382A | 公开（公告）日： | 2017-10-13 |
| 发明（设计）人： | D·玛尔;S·库珀;W·杨 | 申请（专利权）人： | 生物辐射实验室股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/00;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司31100 | 代理人： | 陈扬扬,陶启长 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 提供了使用分裂循环扩增来检测或定量短RNA或DNA分子的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 使用 分裂 循环 扩增 核酸 定量 | ||
【主权项】：
一种对样品中靶DNA模板的量进行定量的方法，包括：a)形成多个混合物划分产物，其中所述混合物划分产物包含：i)靶DNA模板；ii)热稳定的DNA依赖性DNA聚合酶；和iii)正向和反向扩增引物，其中所述扩增引物包含3’杂交区域，其与所述靶DNA模板杂交并在所述DNA依赖性DNA聚合酶存在下引发模板引导的引物延伸；所述正向或反向扩增引物还包含不与所述靶DNA模板互补的5’尾区域；并且所述正向和反向扩增引物具有超过所述靶DNA模板长度的组合长度；并且b)在适于通过聚合酶链式反应扩增靶DNA模板的热循环条件下孵育所述混合物划分产物，其中所述热循环条件包括第一组温度循环和第二组温度循环，其中所述第二组温度循环包括比所述第一组温度循环的退火温度高至少5℃的退火温度；并且c)检测所述混合物划分产物中扩增的靶DNA模板的存在或不存在并确定其中所述靶DNA模板存在时的划分产物的比例；从而对所述样品中靶DNA模板的量进行定量。
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