[发明专利]一种基于免标记分子信标的级联扩增DNA机器及应用

摘要

本发明公开了一种基于免标记分子信标的级联扩增DNA机器及应用，级联扩增DNA机器包括T7 Exo、RMB和SMB，该RMB和SMB含有凸出的5’末端，保护其不受T7 Exo切割。首先，端粒酶延伸TS引物，产生含有串联重复序列(TTAGGG)n的TEP。然后，TEP与RMB杂交，活化了此DNA机器，展开RMB使其含有平或凹的5’末端，使其失去保护，引发T7 Exo的循环切割，释放完整的TEP和大量DNA片段(引发DNA)，实现一级扩增。接着，引发DNA特异性打开SMB，并被T7 Exo循环，释放大量G4序列，实现二级扩增。最终，TEP和释放的G4序列与NMM发生强烈相互作用，共同产生明显增强的荧光。