[发明专利]一种高直链淀粉各组分含量的分析方法

摘要

本发明公开了一种高直链淀粉各组分含量的分析方法，该方法包括淀粉溶液的制备、淀粉各组分的琼脂糖凝胶层析柱分离、各组分含量的测定等步骤。该测定方法简单、方便，结果重现性好，并能用少量淀粉同时定量测定淀粉中直链淀粉、中间组分和支链淀粉的含量，也能够分离和富集淀粉不同组分，为高直链淀粉分子结构的研究提供技术支持。

主权项

1.一种高直链淀粉各组分含量的分析方法，其特征在于：将高直链淀粉制备成溶液并冷却，过滤后上样到琼脂糖凝胶层析柱，用淋洗液清洗后，恒流速通入淋洗液并接样，通过蒽酮‑硫酸法和碘比色法测定样品，计算其中支链淀粉组分、中间组分及直链淀粉组分的含量；所述淋洗液包括24～26mmol/L NaCl与0.8～1.2mmol/L NaOH的混合液；所述高直链淀粉制备成溶液，其是取高直链淀粉向其中加入蛋白酶溶液，混匀后在35～40℃、300～400rpm条件下孵育25～35min，混匀离心，去除上清液后加入亚硫酸氢钠溶液，混匀后在37℃、300 ～400rpm条件下反应25～35min，混匀离心去除上清液，快速加入溴化锂/二甲基亚砜，混匀，在75～85℃、300～400rpm条件下8～10h，取出冷却至室温，离心8～12min，去除上清液加底物体积3～5倍的无水乙醇，离心8～12min后去除上清液，吸水纸干燥8～12min，用60～ 80℃的水溶解样品，制成0.1～0.3％浓度的溶液，沸水浴25～35min后，得到高直链淀粉溶液；所述蛋白酶溶液pH为7.0～8.0，酶活为2.0～3.0U/mL，其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.04～0.06mL；所述亚硫酸氢钠溶液其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.04～0.06mL，其中，亚硫酸氢钠与溶液的质量体积比为0.004～0.005：1；所述溴化锂/二甲基亚砜，其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.12～0.18mL，其中，溴化锂占二甲基亚砜的质量分数为0.4～0.6％。