[发明专利]一种高直链淀粉各组分含量的分析方法

说明书

本发明公开了一种高直链淀粉各组分含量的分析方法，该方法包括淀粉溶液的制备、淀粉各组分的琼脂糖凝胶层析柱分离、各组分含量的测定等步骤。该测定方法简单、方便，结果重现性好，并能用少量淀粉同时定量测定淀粉中直链淀粉、中间组分和支链淀粉的含量，也能够分离和富集淀粉不同组分，为高直链淀粉分子结构的研究提供技术支持。

技术领域

本发明属于淀粉组分检测技术领域，具体涉及一种高直链淀粉各组分含量的分析方法。

背景技术

淀粉主要由直链淀粉、中间组分和支链淀粉组成，其中中间组分主要存在于高直链淀粉中。直链淀粉主要是由α-1,4糖苷键相连的线性葡萄糖聚合物；支链淀粉除了α-1,4糖苷键外，还有α-1,6糖苷键形成的高度分支的葡萄糖聚合物；中间组分的分子量与直链淀粉相似，但有许多侧链，并且侧链长度比支链淀粉侧链长。淀粉各组分的含量和分子结构是评价淀粉品质的主要依据和重要指标，决定淀粉的用途。

直链淀粉含量的提高影响淀粉的特性和用途，如高直链淀粉的作物籽粒富含抗性淀粉，而抗性淀粉可以促进人体胆固醇和血脂质的代谢、控制膳后血糖值、减少肠机能失调及结肠癌发病率、控制体重和能量平衡、促进矿物质的吸收、增加营养，能降低一些慢性病(如糖尿病、大肠癌、肥胖等)的发病风险，具有提高人体健康功能的特性。另外，高直链淀粉由于拥有难糊化、易老化和成膜性高等特点，也具有特殊的工业用途。因此高直链淀粉的研究受到人们的普遍关注。

淀粉按各组分含量的不同分为糯性淀粉、普通淀粉和高直链淀粉，其中糯性淀粉主要含有支链淀粉组分；普通淀粉主要包含支链淀粉和直链淀粉，中间组分的含量较少；而高直链淀粉除了包含支链淀粉和直链淀粉外，还含有很高的中间组分，并且其含量和分子结构在不同来源的高直链淀粉中差异极大，对淀粉品质和用途也有显著影响。而目前现有的测定方法仅适用于对糯性淀粉和普通淀粉各组分的测定，而对高直链淀粉中的中间组分无法分析。鉴于高直链淀粉普遍受到人们的重视，因此亟需建立一种准确、快速，大多数实验室有能力完成的并且能够分离和分析高直链淀粉各组分含量的方法，为高直链淀粉各组分的含量测定和分子结构研究提供技术支持。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于上述和/或现有高直链淀粉各组分测定的技术空白，提出了本发明。

因此，本发明目的是解决现有技术中的不足，提供一种高直链淀粉各组分含量的分析方法。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种高直链淀粉各组分含量的分析方法，将高直链淀粉制备成溶液并冷却，过滤后上样到琼脂糖凝胶层析柱，用淋洗液清洗后，恒流速通入淋洗液并接样，通过蒽酮-硫酸法和碘比色法测定样品，计算其中支链淀粉组分、中间组分及直链淀粉组分的含量；所述淋洗液包括24～26mmol/L NaCl与0.8～1.2mmol/L NaOH的混合液。

作为本发明所述高直链淀粉各组分含量的分析方法的一种优选方案，其中：所述高直链淀粉制备成溶液，其是取高直链淀粉向其中加入蛋白酶溶液，混匀后在35～40℃、300～400rpm条件下孵育25～35min，混匀离心，去除上清液后加入亚硫酸氢钠溶液，混匀后在37℃、300～400rpm条件下反应25～35min，混匀离心去除上清液，快速加入溴化锂/二甲基亚砜，混匀，在75～85℃、300～400rpm条件下8～10h，取出冷却至室温，离心8～12min，去除上清液加底物体积3～5倍的无水乙醇，离心8～12min后去除上清液，吸水纸干燥8～12min，用60～80℃的水溶解样品，制成0.1～0.3％浓度的溶液，沸水浴25～35min后，得到高直链淀粉溶液。