[发明专利]一种高直链淀粉各组分含量的分析方法

权利要求书

1.一种高直链淀粉各组分含量的分析方法，其特征在于：

将高直链淀粉制备成溶液并冷却，过滤后上样到琼脂糖凝胶层析柱，用淋洗液清洗后，恒流速通入淋洗液并接样，通过蒽酮-硫酸法和碘比色法测定样品，计算其中支链淀粉组分、中间组分及直链淀粉组分的含量；

所述淋洗液包括24～26mmol/L NaCl与0.8～1.2mmol/L NaOH的混合液；

所述高直链淀粉制备成溶液，其是取高直链淀粉向其中加入蛋白酶溶液，混匀后在35～40℃、300～400rpm条件下孵育25～35min，混匀离心，去除上清液后加入亚硫酸氢钠溶液，混匀后在37℃、300 ～400rpm条件下反应25～35min，混匀离心去除上清液，快速加入溴化锂/二甲基亚砜，混匀，在75～85℃、300～400rpm条件下8～10h，取出冷却至室温，离心8～12min，去除上清液加底物体积3～5倍的无水乙醇，离心8～12min后去除上清液，吸水纸干燥8～12min，用60～ 80℃的水溶解样品，制成0.1～0.3％浓度的溶液，沸水浴25～35min后，得到高直链淀粉溶液；

所述蛋白酶溶液pH为7.0～8.0，酶活为2.0～3.0U/mL，其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.04～0.06mL；

所述亚硫酸氢钠溶液其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.04～0.06mL，其中，亚硫酸氢钠与溶液的质量体积比为0.004～0.005：1；

所述溴化锂/二甲基亚砜，其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.12～0.18mL，其中，溴化锂占二甲基亚砜的质量分数为0.4～0.6％。

2.如权利要求1所述高直链淀粉各组分含量的分析方法，其特征在于：所述琼脂糖凝胶层析柱，其是将琼脂糖CL-2B作为填料，装柱后用所述淋洗液冲洗柱子20～28h，淋洗速度为0.4～0.6mL/min。

3.如权利要求1所述高直链淀粉各组分含量的分析方法，其特征在于：所述碘比色法，其中，淀粉的碘吸收光谱测定方法包括将样品、碘液及水混合，反应8～12min，用分光光度计测OD630nm处吸光度为淀粉碘吸收值，分析每管样品最大吸收峰的峰值对应的波长。

4.如权利要求1所述高直链淀粉各组分含量的分析方法，其特征在于：所述蛋白酶溶液是用缓冲液溶解的，其中缓冲液的制作方法包括，将N-甘氨酸添加到水中，并将其pH调至7.0～8.0。

5.如权利要求1所述高直链淀粉各组分含量的分析方法，其特征在于：所述琼脂糖凝胶层析柱，其柱长为50cm，柱内径为1.6cm。

6.如权利要求1所述高直链淀粉各组分含量的分析方法，其特征在于：所述恒流速通入淋洗液，其通入流速为0.4～0.6mL/min。