[发明专利]一种利用铁载体制备富铁酵母的方法

摘要

本发明公开一种利用铁载体制备富铁酵母的方法，采用筛选耐高铁并能产生铁载体的菌株、产铁载体最优菌的筛选、利用筛选的最优菌进行酵母铁的制备方法。本发明为后续通过在酿酒酵母中加入不同类型的铁载体或不同菌体产生的铁载体，筛选出高活性铁载体，能使酵母具有高转化铁的能力，为通过酵母来制备有机铁提供一个新思路；通过铁载体添加制备富铁酵母，具有酵母细胞铁转化率高，所得富铁酵母铁与常规增加培养基铁含量或者是对啤酒酵母进行菌株诱变制备富铁酵母的方法相比，含量明显增加；本发明中，最优菌胞内铁含量增长幅度为126.57%，细胞数增长幅度为248.3%；本发明中酵母铁其胞内铁含量为61.361mg/g。

主权项

一种利用铁载体制备富铁酵母的方法，其特征在于，所述利用铁载体制备酵母铁的方法包括以下步骤：筛选耐高铁并能产生铁载体的菌株：通过菌株筛选的方法，逐步增加铁浓度，筛选出耐高铁的菌株；利用CAS平板法，从耐高铁菌株中，筛选出能产生铁载体的菌株；配制YPD培养基，进行接种，使筛选出的产生铁载体的菌株产生铁载体；产铁载体最优菌的筛选：活化所有耐高铁并能产生铁载体的菌株，发酵，生成铁载体；进行离心，收集上清；利用CAS检测液，测上清的OD₆₃₀；对活化酿酒酵母进行接种，作为种子液；配制与耐高铁并能产生铁载体的菌株相同数量的培养液，加入种子液；测定加入铁载体前后细胞数和胞内铁含量；计算加入不同菌株铁载体前后酿酒酵母细胞数和胞内铁含量增长幅度，筛选出最优菌；利用筛选的最优菌进行酵母铁的制备：批量发酵最优菌，YPD培养液中加入最优菌产铁载体的最佳铁离子浓度的铁，离心，收集上清，判定有铁载体产生；配制YPD培养基，加入酿酒酵母，并加入上清铁载体，发酵；过滤收集菌体；将所收集菌体放至已预处理过的透析袋内进行透析，将透析液离心，收集菌体，干燥；将所干燥菌体，消化，测胞内铁含量，酵母铁制备完成。