[发明专利]可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法在审
| 申请号： | 201610436713.1 | 申请日： | 2016-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN106609265A | 公开（公告）日： | 2017-05-03 |
| 发明（设计）人： | 袁国红;赵曙红;刘彬;刘庆柱;杨亮 | 申请（专利权）人： | 袁国红 |
| 主分类号： | C12N5/095 | 分类号： | C12N5/095 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100000 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因工程技术领域，具体是可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法。包括胶质瘤干细胞分离、胶质瘤干细胞悬浮液培养和胶质瘤干细胞粘附培养。干细胞分离具体步骤包括(1)获取胶质瘤组织放，(2)取出组织、漂洗；(3)剪碎组织，加入消化酶，37℃消化30分钟，每5分钟吹打一次；(4)终止反应，离心；(5)清洗；(6)计数，接种，培养。第二步进行胶质瘤干细胞粘附培养，冻存，具体步骤包括(1)上述细胞，成球后，消化成单细胞，离心；(2)计数，传代第二天换液，余隔天换液；(3)密度大于90％，消化成单细胞，传代或冻存。本发明提供的胶质细胞原代培养方法简单易于操作，胶质瘤干细胞贴壁原代培养成功率高。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 体外 胶质 干细胞 药物 筛选 应用 模型 制备 方法 | ||
【主权项】：
可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法：包括胶质瘤干细胞分离、胶质瘤干细胞悬浮液培养和胶质瘤干细胞粘附培养。
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- 2015-01-22 - 2015-04-22 - C12N5/095
- 本发明涉及一种肝癌干细胞的分离方法，包括如下步骤：1)将肝癌细胞用DMEM高糖培育基进行培养；2)将步骤1得到的肝癌细胞培养液进行消化传代；3)取步骤2中消化传代呈对数生长期的传代细胞，用流式分选荧光抗体CD90和CD24进行标记，然后用流式细胞仪分选，CD90和CD24都标记上的CD90+CD24+肝癌细胞亚群即为分离得到的肝癌干细胞。本发明选取两种标志物进行联合检测，提高了肝癌干细胞的分离和鉴定的成功率。操作简单，可以快速、高效地分离出肝癌干细胞，提供了一种新的分离肝癌干细胞的方法，具有良好的应用前景。
- 肺癌干细胞条件3D培养方法-201510027228.4
- 于津浦;任秀宝;刘芃芃;郝希山 - 天津医科大学肿瘤医院
- 2015-01-20 - 2015-04-22 - C12N5/095
- 本发明公开了一种肺癌干细胞条件3D培养方法，属于细胞培养方法。本发明是将人肺腺癌细胞系A549用含10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养基，置于培养箱中培养，取对数生长期细胞悬液，调整细胞浓度为5×104个细胞/ml，取200μL/孔加到已铺好50μL/孔BME的96孔板里；第3天，用含IGF-1和FGF的RPMI-1640完全培养基给A549细胞换液，继续培养；并经蛋白水解酶消化BME、回收液回收A549细胞，最后进行细胞鉴定。这样设计的本发明，A549细胞在体外形成类似体内肿瘤团块的克隆团，更加接近体内立体生长状态，从而实现干细胞的稳定分离、有效扩增。筛选出对抗癌药物抵抗的肿瘤干细胞。
- 乳腺癌干细胞制备方法及其抗原组合物与抗肿瘤应用-201410300288.4
- 沈丽;郝丽敏 - 北京弘润源生物技术有限公司
- 2014-06-30 - 2014-10-08 - C12N5/095
- 本发明提供了一种制备乳腺癌干细胞的方法，其中，所述方法包括鉴定待测乳腺癌细胞标本中是否存在乳腺癌干细胞的步骤：所述步骤包括检测所述待测乳腺癌细胞标本中是否特异表达以下差异蛋白的至少两种：ATP结合框亚家族G成分2、五次跨膜单链糖蛋白PROM1、乙醛脱氢酶-1和磷酸酶与张力蛋白同源物。本发明还提供了制备所述乳腺癌干细胞抗原组合物及其抗肿瘤应用，该抗原组合物负载树突状细胞获得树突状细胞疫苗、制备所述树突状细胞疫苗的试剂盒、以及所述树突状细胞疫苗的抗肿瘤应用。
- 一种中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-1及其建立方法-201310374517.2
- 张雁;贺姮;张海霞;汪华 - 中山大学
- 2013-08-23 - 2014-08-06 - C12N5/095
- 本发明提供了一种中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系的建立方法，为研究人舌部鳞状上皮细胞癌的特性及其治疗药物提供了物质基础。该建立方法包括如下具体步骤：采用组织块贴壁法进行舌部鳞状上皮细胞癌细胞的原代培养；当细胞密度达到约80%的时候进行传代培养；将传代稳定的细胞经RT-PCR检测表明细胞表达人舌部鳞状上皮细胞癌细胞标志性分子CK8、18、19；经免疫印迹实验检测贴壁细胞表达人舌部鳞状上皮细胞癌细胞标志性分子CK8、18蛋白，由此从分子水平上证明成功建立中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-1。
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