[发明专利]一种从黄酒麦曲中提取微生物总DNA的方法

摘要

本发明公开了一种从黄酒麦曲中提取微生物总DNA的方法，属于分子生物学技术领域。本发明方法是将麦曲置于ddH2O中并结合玻璃珠和超声清洗振荡将菌体进入悬液，离心得到菌体后加入DNA抽提液取，液氮研磨后加入溶菌酶，再加入SDS及蛋白酶K后65℃水浴45～65min，之后加入CTAB提取液后水浴45～65min，得到的DNA粗提液经过纯化后得到总DNA样品。采用本发明方法得到麦曲中总DNA样品DNA质量浓度达到149.6ng/μL，对其中的真菌及细菌PCR扩增后进行电泳得到的条带单一明亮，A260/A280达到1.93，A260/A230达到1.84，说明本方法很好的避免了蛋白、多糖及小分子等的污染，且所得样品不用经过试剂盒纯化，可直接用于后续分子生物学的分析。

主权项

一种从黄酒麦曲中提取微生物总DNA的方法，其特征在于按照下述步骤进行：(1)在麦曲中加入ddH2O和吐温80，并加入玻璃珠，振荡摇匀，然后在超声波清洗器中振荡5～10min，使麦曲中的菌体尽量进入悬液中，低速离心后取上清；(2)将步骤(1)得到的悬液高速离心的菌体沉淀；(3)向步骤(2)得到的菌体中加入DNA抽提液，混悬后液氮条件下充分研磨；(4)向步骤(3)得到的溶液中加入溶菌酶，于37℃条件下放置30～40min；(5)向步骤(4)得到的溶液中加入加入SDS溶液并立即蛋白酶K，65℃水浴45～65min；(6)向步骤(5)得到的溶液中加入CTAB抽提液，65℃水浴45～65min；(7)将步骤(6)得到DNA粗提液进行纯化得到麦曲总DNA。