[发明专利]高压脉冲电场辅助酶解提取河蚌蛋白质工艺

摘要

本发明提供了高压脉冲电场辅助酶解提取河蚌蛋白质工艺，该具体过程为：步骤a，原料及预处理；步骤b，打浆；步骤c，均质；步骤d，高压脉冲电场预处理；步骤e，酶解提取；步骤f，分离；步骤g，除腥；步骤h，浓缩；步骤i，干燥。该工艺设置3个变量：电场强度、脉冲数和酶解时间；利用design expert软件根据Box-Behnken设计优化出最佳提取工艺为电场强度19.29kV/cm，脉冲数8.12个，酶解时间2.07h，河蚌蛋白提取率预测值为77.1417％。本发明以松花江野生河蚌肉为原料，利用高压脉冲电场辅助木瓜蛋白酶解提取河蚌蛋白质，工艺简单、条件温和，提取率高。野生河蚌资源丰富，价格低廉仅为打捞成本0.5元/斤。河蚌肉提取蛋白粉营养价值高，应用广，具有广阔的应用开发前景。

主权项

一种高压脉冲电场辅助酶解提取河蚌蛋白质工艺，其特征在于，以河蚌肉为原料，利用高压脉冲电场辅助木瓜蛋白酶酶解河蚌肉蛋白并借助响应面优化提取工艺，其工艺流程和操作步骤如下：高压脉冲电场辅助酶解提取河蚌蛋白质工艺流程：原料及预处理→打浆→均质→高压脉冲电场预处理→酶解提取→分离→除腥→浓缩→干燥→河蚌蛋白粉；高压脉冲电场辅助酶解提取河蚌蛋白质操作步骤与要点如下：(1)原料及预处理：新鲜的河蚌用水清洗其表面泥污，用刀将其剖开，去除蚌壳、蚌泪及内脏组织，取蚌肉用清水清洗干净，沥除其表面水分，‑18℃以下冷冻备用；(2)打浆：将冷冻的蚌肉从冰柜中取出，室温下解冻，用打浆机打浆；(3)均质：将打浆后的蚌肉浆液置于胶体磨中均质，得到均一的蚌肉浆液；(4)高压脉冲电场预处理：底物浓度以蚌肉中总蛋白含量计算，加入一定比例蒸馏水，调节底物浓度为4％，将料液混合均匀，以10mL/min流速经蠕动泵泵送高压脉冲电场处理室，电场强度15‑25kV/cm，脉冲数6‑10个；(5)酶解提取：调节经高压脉冲电场预处理后的浆液pH至5.5，加入酶活为4000U/g蛋白质的木瓜蛋白酶，搅拌均匀后于50℃恒温水浴振荡器中酶解反应1.5‑2.5h，酶解过程中保持反应体系pH值恒定在5.5左右，反应结束后迅速于沸水浴中加热10‑15min以使酶失活，灭酶后将反应物置于冷水中冷却至室温；(6)分离：将经灭酶和冷却后的蚌肉酶解液置于低速离心机中离心(4000r/min，10min)，取上清液，即为蚌肉蛋白提取液；(7)除腥：在蚌肉蛋白提取液中加入1％(质量体积比)活性干酵母，混合均匀后，于35℃恒温水浴振荡器中反应60min，将经除腥处理后的反应物进行离心分离(10000r/min,10min)，上清液即为除腥后的蚌肉蛋白提取液；(8)浓缩：将得到的经除腥后的蚌肉蛋白提取液置于旋转蒸发仪中，在50℃条件下减压浓缩至可溶性固形物含量为15％‑25％，即为蚌肉蛋白浓缩液；(9)干燥：将蚌肉蛋白浓缩液经喷雾干燥后即得河蚌蛋白粉。