[发明专利]一种榆树枯萎病菌的分子检测方法有效
| 申请号： | 201510078255.4 | 申请日： | 2015-02-13 |
| 公开（公告）号： | CN104630371B | 公开（公告）日： | 2017-01-18 |
| 发明（设计）人： | 叶建仁;陶兆雪;王焱;张培;吴小芹;周爱东 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙)32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种榆树枯萎病菌的分子检测方法，以待测样品DNA为模板，以通用引物ITS1‑F/ITS4‑B进行巢式PCR的第一轮反应，以第一轮反应产物为模板，以引物OpF和引物OpR为特异性引物，进行巢式PCR的第二轮反应，反应产物进行电泳检测，电泳图中出现304bp条带即为检测出榆树枯萎病菌，否则未检出；其中，引物OpF序列为5'‑GCCCGCCACTGGTTTTGA‑3'；引物OpR序列为5'‑CCGCCCGAACCTTTTCCA‑3'。该方法为榆树枯萎病菌的检测和评估提供一种准确、快速的途径，引物OpF和引物OpR具有很强的特异性，本方法的检测灵敏度能够达到常规PCR的10倍。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 榆树 枯萎 病菌 分子 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种榆树枯萎病菌的分子检测方法，其特征在于：以待测样品DNA为模板，以通用引物ITS1‑F/ITS4‑B进行巢式PCR的第一轮反应，以第一轮反应产物为模板，以引物OpF和引物OpR为特异性引物，进行巢式PCR的第二轮反应，反应产物进行电泳检测，电泳图中出现304bp条带即为检测出榆树枯萎病菌，否则未检出；其中，引物OpF序列为：5'‑GCCCGCCACTGGTTTTGA‑3'；引物OpR序列为：5'‑CCGCCCGAACCTTTTCCA‑3'；ITS1‑F的序列为：5'‑CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA‑3'，ITS4‑B的序列为：5'‑CAGGAGACTTGTACACGGTCCAG‑3'。
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