[发明专利]产气荚膜梭菌肠毒素阳性菌双重荧光定量PCR快速检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 201410821981.6 申请日: 2014-12-25
公开(公告)号: CN104531867A 公开(公告)日: 2015-04-22
发明(设计)人: 张蓉蓉;艾地云;张腾飞;罗青平;邵华斌;温国元;王红琳;汪宏才;罗玲 申请(专利权)人: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04
代理公司: 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 代理人: 崔友明
地址: 430064 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明涉及一种特异检测产气荚膜梭菌肠毒素阳性菌感染的荧光定量PCR检测试剂盒,包括:a)荧光定量反应液、b)产气荚膜梭菌外毒素cpa阳性和产气荚膜梭菌肠毒素cpe阳性质控品、c)阴性质控品;其中荧光定量反应液包含有引物2对和探针1对,为产气荚膜梭菌外毒素cpa的上游引物cpa01和下游引物cpa02以及荧光探针cpap;产气荚膜梭菌肠毒素cpe的上游引物cpe01和下游引物cpe02以及荧光探针cpep,本发明具有以下优点:能够对肠毒素cpe阳性的产气荚膜梭菌进行快速诊断;特异性好,灵敏度高,假阳性率低;检测速度快,仅需1个半小时。
搜索关键词: 荚膜 梭菌肠 毒素 阳性 双重 荧光 定量 pcr 快速 检测 试剂盒
【主权项】:
产气荚膜梭菌肠毒素阳性菌双重荧光定量PCR快速检测试剂盒,其特征在于该试剂盒包括:a)荧光定量反应液、b)产气荚膜梭菌外毒素cpa阳性和产气荚膜梭菌肠毒素cpe阳性质控品、c)阴性质控品;其中荧光定量反应液包含有引物2对和探针1对,为产气荚膜梭菌外毒素cpa的上游引物cpa01和下游引物cpa02以及荧光探针cpap;产气荚膜梭菌肠毒素cpe的上游引物cpe01和下游引物cpe02以及荧光探针cpep,其中,产气荚膜梭菌外毒素cpa的引物序列为:上游引物cpa01:5’‑GATTTGTAAGGCGCTTATTTGT‑3’,下游引物cpa02:5’‑ATAGCATGAGTTCCTGTTCCA‑3’,荧光探针cpap:5’‑CTACGCTAGCAACTAGCCTATGGGCTG‑3’,探针上游5’端标记的荧光报告基因是TAMRA,3’端标记的荧光淬灭基团是BHQ‑2;产气荚膜梭菌肠毒素cpe的引物序列为:上游引物cpe01:5’‑AGTGTAAATTAAGCTTTTGAGTCCA‑3’,下游引物cpe02:5’‑TAGCTGCTGCTACAGAAAGATTAA‑3’,荧光探针cpep为5’‑AAGGGTATGAGTTAGAAGAACGCCAATCA‑3’,探针上游5’端标记的荧光报告基因是FAM,3’端标记的荧光淬灭基团是BHQ‑1。
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