[发明专利]一种硼酸介导的聚合酶链反应检测DNA中5‑羟甲基胞嘧啶的方法

摘要

本发明为一种非疾病诊断用途的基于硼酸介导的聚合酶链反应检测DNA中5‑羟甲基胞嘧啶的生化分析方法。本发明结合葡萄糖基化反应，利用硼酸及其衍生物试剂可与葡萄糖基化5‑羟甲基胞嘧啶中的邻二醇发生的共价作用，显著增加被复制碱基单元的体积，有效抑制聚合酶扩增反应的特点，提出硼酸介导的DNA聚合酶链扩增反应，可特异性地识别特定基因/片段中的5‑羟甲基胞嘧啶。本发明涉及的方法不受酶切位点限制，可适用于各种生物样品DNA序列中5‑羟甲基胞嘧啶的生化分析鉴定。本方法具有广阔的应用前景，对于进一步阐明5‑羟甲基胞嘧啶的生物学功能具有重要意义。

主权项

一种非疾病诊断用途的基于硼酸或其衍生物介导的聚合酶链反应(PCR)检测DNA中5‑羟甲基胞嘧啶的生化分析方法，其特征在于：DNA链中的5‑羟甲基胞嘧啶可被葡萄糖基化修饰，其邻二醇可与硼酸或其衍生物发生共价作用，显著抑制含葡萄糖基化5‑羟甲基胞嘧啶DNA片段的复制与扩增；若DNA链不含5‑羟甲基胞嘧啶其复制与扩增则不受影响，通过扩增曲线Ct值的变化对5‑羟甲基胞嘧啶进行定量检测。