[发明专利]一种人血清蛋白质电泳后同位素稀释质谱定量方法

摘要

本发明公开了一种人血清蛋白质电泳后同位素稀释质谱定量方法，属于蛋白质定量分析技术领域，包括：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离人血清中转铁蛋白、白蛋白，开发的“电泳后同位素稀释”方法向蛋白条带上加入富集同位素³⁴S稀释剂，LA‑ICP‑MS检测蛋白条带中³²S⁺/³⁴S⁺比值，对人血清中转铁蛋白、白蛋白进行定量分析。本发明建立的电泳后同位素稀释定量方法试剂配制简单、过程简便快捷、无需制备特异性稀释剂，而且定量方法在PAGE‑LA‑ICP‑MS联用技术中的应用克服了目前蛋白质定量技术中特异性稀释剂种类有限带来的只能对某些蛋白质定量的难题，可推广应用到复杂样品中大多数蛋白质的定量分析。

主权项

一种人血清蛋白质电泳后同位素稀释质谱定量方法，其特征在于所述方法包括：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离人血清中转铁蛋白、白蛋白；利用“电泳后同位素稀释方法”向蛋白条带上加入富集同位素³⁴S稀释剂；LA‑ICP‑MS检测蛋白条带中³²S⁺/³⁴S⁺比值，对人血清中转铁蛋白、白蛋白进行定量分析；所述电泳后同位素稀释方法包括：电泳、染色、脱色处理后，切取待测蛋白条带，浸泡在25～50μg/g的富集同位素³⁴S稀释剂中2～10min，取出转移到甘油中浸泡2～5min，再将凝胶转移到载玻片上，室温过夜干燥，待测备用。