[发明专利]一种单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法有效
| 申请号： | 201410076295.0 | 申请日： | 2014-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN103911432A | 公开（公告）日： | 2014-07-09 |
| 发明（设计）人： | 杨朝勇;朱志;宋彦龄;李聪;邹远;朱玲;安源 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/115 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭 |
| 地址： | 361000 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法。涉及一种核酸适体筛选技术，建立快速、高效的单克隆表面展示核酸适体筛选新方法。所述方法包括如下步骤：（1）将氨基修饰的正向引物通过NHS-氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面；（2）将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面，每个微球上仅展示一种核酸序列；（3）通过单克隆微球库与靶标相关作用，可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度；（4）直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球，获取微球上的DNA序列，即可获得高质量核酸适体。该方法快速、高效、经济，实现了分子识别可视化监测，并可在无需克隆、测序、合成的条件下实现了富集库中核酸适体的快速筛选，获得选择性好、亲和力强的核酸适体。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 单克隆 表面 展示 核酸 快速 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法，将DNA文库单克隆展示于微球表面，实现分子识别可视化监测；所述方法包括如下步骤：（1）将氨基修饰的正向引物通过NHS‑氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面；（2）将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面，每个微球上仅展示一种核酸序列；（3）通过单克隆微球库与靶标相关作用，可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度；（4）直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球，获取微球上的DNA序列，获得高质量核酸适体。
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