[发明专利]用于在体内产生双重特异性免疫球蛋白或者仅高变重链免疫球蛋白的转基因非人脊椎动物

摘要

本发明一方面一般性涉及完全在体内指导选择抗体可变结构域、组合及表达。一项应用是产生多价多肽。本发明涉及多价(例如多特异性)抗体、抗体链和多肽，以及缺乏轻链的仅重链抗体(H2抗体)。本发明进一步涉及这些抗体在非人脊椎动物体内和非人脊椎动物细胞中的选择、成熟和产生。为此，本发明还涉及这种非人脊椎动物和细胞。本发明还涉及提供产生和选择仅重链抗体及包含已经经历亲和性成熟的可变结构域的重链的手段。

主权项

在非人脊椎动物中产生包含体细胞高变的可变区的多肽链的方法，所述方法包括：(a)在脊椎动物中在幼B细胞中表达IgM抗体，其中所述抗体包含分别从重链和轻链基因座中表达的重链和轻链；(b)用预定的表位免疫所述脊椎动物，并获得在至少一些重链基因座中的同种型转换及已经经历体细胞高变的非‑μ抗体的表达，其中所述抗体包含缺少CH1结构域的重链及包含特异性结合所述抗原的可变区；及(c)通过选择结合所述表位的可变区从所述免疫的脊椎动物中选择一或多个多肽链，其中每个选择的链包含特异性结合所述表位的体细胞高变的可变区；及所述方法进一步包括在不存在轻链表达时表达步骤(b)中的非‑μ抗体。