[发明专利]顺式-5-羟基-L-六氢吡啶甲酸的生物学制备方法在审

专利信息
申请号: 201380030961.0 申请日: 2013-06-12
公开(公告)号: CN104395466A 公开(公告)日: 2015-03-04
发明(设计)人: 藤井匡;田村圭辅 申请(专利权)人: 日本迈科洛生物制药有限公司
主分类号: C12N15/00 分类号: C12N15/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/02;C12N15/09;C12P13/24
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 杜艳玲;吕彩霞
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要: 发明提供了制备顺式-5-羟基-L-六氢吡啶甲酸的方法。本发明的制备方法可应用能够直接生产顺式-5-羟基-L-六氢吡啶甲酸的基因重组微生物。本发明也提供了该基因重组微生物。本发明的优选方式的特征是,在培养基中培养具有下列DNA的基因重组微生物:编码参与L-六氢吡啶甲酸的生物合成的蛋白质的DNA、以及编码具有L-六氢吡啶甲酸的顺式-5位羟化酶活性的蛋白质的DNA,并从该培养液获得顺式-5-羟基-L-六氢吡啶甲酸。
搜索关键词: 顺式 羟基 吡啶甲酸 生物学 制备 方法
【主权项】:
顺式‑5‑羟基‑L‑六氢吡啶甲酸或其药学上可接受的盐或者它们的溶剂合物的制备方法,其包含,通过以可表达的状态含有下述(A)~(F)中任一多核苷酸的微生物,以L‑六氢吡啶甲酸为底物生成顺式‑5‑羟基‑L‑六氢吡啶甲酸的步骤:(A)由序列号2记载的碱基序列组成的多核苷酸;(B)与由与序列号2记载的碱基序列互补的碱基序列组成的多核苷酸在严格条件下杂交、并且编码具有催化以L‑六氢吡啶甲酸为底物生成顺式‑5‑羟基‑L‑六氢吡啶甲酸的反应的活性的蛋白质的多核苷酸;(C)与序列号2记载的碱基序列具有至少85%以上的同一性、并且编码具有催化以L‑六氢吡啶甲酸为底物生成顺式‑5‑羟基‑L‑六氢吡啶甲酸的反应的活性的蛋白质的多核苷酸;(D)编码由序列号25记载的氨基酸序列组成的蛋白质的多核苷酸;(E)编码由在序列号25记载的氨基酸序列中置换、缺失、插入、和/或添加1个或多数氨基酸而成的氨基酸序列组成、并且具有催化以L‑六氢吡啶甲酸为底物生成顺式‑5‑羟基‑L‑六氢吡啶甲酸的反应的活性的蛋白质的多核苷酸;(F) 编码由与序列号25记载的氨基酸序列具有至少85%以上同一性的氨基酸序列组成、并且具有催化以L‑六氢吡啶甲酸为底物生成顺式‑5‑羟基‑L‑六氢吡啶甲酸的反应的活性的蛋白质的多核苷酸。
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