[发明专利]一种用于松木及其制品的松材线虫检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了一种用于松木及其制品的松材线虫检测试剂盒，它包括以下成分：松木及其制品松材线虫检测正向引物、反向引物和荧光探针；Premix Ex Taq；松材线虫DNA模板；灭菌双蒸水；DNA裂解液；蛋白酶K。本发明还公开了上述试剂盒检测松木及其制品中松材线虫的方法，与现有技术比较，本发明的松木及其制品松材线虫检测试剂盒中引物与探针具有更强的特异性、更高的灵敏度，且对松木及其制品可以进行直接松材线虫检测，检测程序与结果判读程序均为自动化处理，检测结果以样品“含有松材线虫”或“不含有松材线虫”显示。从而为松材线虫病的疫情检测、鉴定提供了更加快速、便利、高效的检测方法。

主权项

一种用于松木及其制品的松材线虫检测试剂盒，其特征在于，它包括以下成分：（1）松木及其制品松材线虫检测正向引物、反向引物和荧光探针：正向引物：5′‑GAGCAGAAACGCCGACTT‑3′；反向引物：5′‑CGTAAAACAGATGGTGCCTA‑3′；荧光探针：5′‑FAM‑TGCACGTTGTGACAGTCGT‑BHQ1‑3′；（2）Premix Ex Taq；（3）阳性对照：松材线虫DNA模板；（4）阴性对照：灭菌双蒸水；（5）DNA裂解液：2.0～3.0mM二硫苏糖醇，1.0～1.5v/v%吐温20，0.8～1.2mM明胶，1.0～1.5mM KCl，l.0～2.0mM pH8.3三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，3.0～4.0mM MgCl2；（6）蛋白酶K。