[发明专利]一种利用微生物发酵生产4-乙基愈创木酚的方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种利用微生物发酵生产4-乙基愈创木酚的方法。该方法以环状芽孢杆菌HG12菌株为生产菌种，其特征为，将HG12菌株的液体种子接种到液体发酵培养基中，发酵，制得发酵液，将发酵液过滤，收集滤出液；向滤出液中接种酒香酵母菌株的液体种子，发酵，制得含有4-乙基愈创木酚的发酵液；将发酵液过滤，收集滤出液，向滤出液中加入萃取剂，制得含有4-乙基愈创木酚的萃取液，将萃取液真空蒸发，制得4-乙基愈创木酚。本发明可以实现4-乙基愈创木酚生产的连续化、规模化；并且4-乙基愈创木酚的生产工艺简便，生产周期短，生产成本低，极具工业化应用前景。

主权项

一种利用微生物发酵生产4‑乙基愈创木酚的方法，以菌种保藏编号为CGMCC No.8044的环状芽孢杆菌（Bacillus circulans）HG12菌株为生产菌种，其特征为，包括如下步骤：（1）将环状芽孢杆菌HG12菌株的液体种子按体积比为3‑5%的接种量接种到液体发酵培养基中，在37‑40℃、160‑200r/min下，发酵36‑60h，制得发酵液，将发酵液用微孔滤膜过滤，收集滤出液，调pH值为5.0‑6.0，制得含有4‑乙烯基愈创木酚的滤出液；（2）向滤出液中接种体积比为5‑10%接种量的酒香酵母菌株的液体种子，在28‑30℃下，发酵12‑36h，制得含有4‑乙基愈创木酚的发酵液；（3）将发酵液用微孔滤膜过滤，收集滤出液，向滤出液中加入萃取剂，混合均匀，静置分相，制得含有4‑乙基愈创木酚的萃取液，将萃取液真空蒸发，制得4‑乙基愈创木酚。