[发明专利]一种利用3基因聚合效应选育山羊产羔性状的方法

摘要

本发明公开了一种利用3基因聚合效应选育山羊产羔性状的方法，以山羊基因组DNA为模板，利用3对引物分别扩增干细胞因子（SCF）基因的3'非翻译区，III型跨膜酪氨酸激酶受体（KIT）基因的外显子7以及亲吻素（KISS1）基因的内含子1，以浓度为1.5%的琼脂糖凝胶电泳对各扩增产物进行大小判定，采用DNA测序技术筛查3对引物扩增产物的位点突变，然后利用浓度为10%的聚丙烯酰胺凝胶电泳和浓度为3.5%的琼脂糖凝胶电泳对SCF、KIT和KISS1基因的3个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析，分析不同基因型组合与产羔数之间的关系，筛选最佳基因型组合。

主权项

一种利用3基因聚合效应选育山羊产羔性状的方法，其特征在于，以山羊基因组DNA为模板，在PCR条件下，利用3对引物P1、P2和P3，分别扩增干细胞因子（SCF）基因的3'非翻译区，III型跨膜酪氨酸激酶受体（KIT）基因外显子7和亲吻素（KISS1）基因的内含子1，其中：所述的引物P1如下：上游引物1F：5'‑CCTCAGAAGTGAAGGTGCAGAGTCC‑3'；下游引物1R：5'‑CAATGAGGACCAGTCATGTGCCAG‑3'；所述的引物P2如下：上游引物2F：5'‑GGTAGGTGATCCACAGGT‑3'；下游引物2R：5'‑TGGTCAGCGAATTGTAGG‑3'；所述的引物P3如下：上游引物3F：5'‑CCCGCTGTAACTAGAGAAAG‑3'；下游引物3R：5'‑CATCCAGGGTGAGTGATACT‑3'；引物P1扩增干细胞因子（SCF）基因的3'非翻译区，用于筛查山羊干细胞因子（SCF）基因的3'非翻译区位点的突变；引物P2扩增III型跨膜酪氨酸激酶受体（KIT）基因外显子7，用于筛查山羊III型跨膜酪氨酸激酶受体（KIT）基因外显子7位点的突变；引物P3扩增亲吻素（KISS1）基因的内含子1，用于筛查山羊亲吻素（KISS1）基因内含子1位点的突变；用浓度为1.5%的琼脂糖凝胶电泳对3对引物扩增产物进行大小判定，然后采用DNA测序技术筛查到干细胞因子（SCF）基因的3'非翻译区，III型跨膜酪氨酸激酶受体（KIT）基因外显子7和亲吻素（KISS1）基因的内含子1共有3个碱基的突变；再利用浓度为10%聚丙烯酰胺凝胶和浓度为3.5%琼脂糖凝胶电泳对这 3个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析，分析不同基因型组合与山羊产羔数之间的关系，挑选最佳的基因型组合，分析拥有最佳基因型组合个体的选配方式，应用这些选配方式形成山羊多羔的多基因聚合良种核心群。