[发明专利]一种海参活性胶原蛋白的提取方法

摘要

本发明涉及一种海参活性胶原蛋白的提取方法，将把鲜活海参除去内脏，切成碎块，用蒸馏水搅拌，过滤后再用Tris-HCl搅拌，过滤后，离心所得胶原纤维沉淀加入NaOH溶液中，搅拌、离心，沉淀加入含胃蛋白酶的乙酸溶液中，搅拌过夜，离心，沉淀透析后得活性胶原蛋白，以上所有操作均在0～4℃条件下进行。本发明工艺简单，提取率高，且胶原蛋白的三维螺旋结构保存完好，具有较高的科研和应用价值。

主权项

一种海参活性胶原蛋白的提取方法，其特征在于：包括以下提取步骤：(1) 把鲜活海参除去内脏，用剪刀剔除内壁肌肉层，剩余海参体壁用刀切成碎块；(2) 加入10倍重量的蒸馏水，搅拌30 min，用纱布滤出，再加入10倍重量的蒸馏水重洗一次；(3) 然后将海参碎块放于10倍重量的0.1 mol/L Tris‑HCl溶液中，溶液pH为8.0，还含有4 m mol/L 的EDTA，搅拌过夜；(4) 用纱布过滤后，再用蒸馏水洗2次，置于10倍重量的蒸馏水中搅拌过夜，溶液中即充满絮状胶原纤维，用纱布滤出未解离的海参块，重复上述操作；(5) 将溶液以12000rpm离心30 min；(6) 所得胶原纤维沉淀加入25倍体积的0.1 mol/L NaOH溶液中，搅拌2d；(7) 12000rpm离心30min，沉淀水洗至中性，加入25倍体积的0.5 mol/L乙酸，加入0.5％的胃蛋白酶，搅拌、消化2天；(8) 12000rpm离心30min，上清液缓慢加入研磨精细的NaCl，溶液终浓度为0.9 mol/L，搅拌过夜；(9) 12000rpm离心30min，去上清，沉淀加入少许0.5 mol/L乙酸溶解，转入透析袋内对0.1 mol/L乙酸透析2d，再用蒸馏水透析2d，冷冻干燥后即得活性胶原蛋白，以上所有操作均在4℃下进行。