[发明专利]3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸甲酯的生物制备方法无效
| 申请号： | 201210555608.1 | 申请日： | 2012-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN103014081A | 公开（公告）日： | 2013-04-03 |
| 发明（设计）人： | 乐庸堂;鞠鑫 | 申请（专利权）人： | 苏州汉酶生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12N9/10 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 孙仿卫;汪青 |
| 地址： | 215600 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸甲酯的生物制备方法，其以3-羰基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸甲酯为底物，该底物在生物催化剂、辅因子、氨基供体和助溶剂的存在下发生反应生成目标产物3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸甲酯，所述的生物催化剂为重组转氨酶，所述的反应在pH为6.0-9.0的水相缓冲液中进行。本发明首次实现了采用重组转氨酶将3-羰基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸甲酯转化为3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸甲酯，与传统的化学法相比，本发明能耗低，操作简单方便，副产物少，并且产物的光学活性较高。 | ||
| 搜索关键词： | 氨基 苯基 丁酸 生物 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种3‑氨基‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)丁酸甲酯的生物制备方法，其特征在于：其以3‑羰基‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)丁酸甲酯为底物，该底物在生物催化剂、辅因子、氨基供体和助溶剂的存在下发生反应生成目标产物3‑氨基‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)丁酸甲酯，所述的生物催化剂为重组转氨酶，所述的重组转氨酶的制备方法为：将含有转氨酶的单菌落接种到含卡那霉素抗性的液体LB培养基中，于35‑40℃下活化8‑12小时，将活化后得到的培养物转接到含卡那霉素抗性的液体LB培养基中，于35‑40℃下扩大培养至OD600值达到0.6‑0.8，加入诱导剂，于25‑35℃继续培养8‑12小时，离心，收集沉淀物，加入磷酸盐缓冲液得到悬浮液，将悬浮液置于冰浴中超声波破碎8‑12分钟，再离心，将上清液预冻至温度为‑10~‑25℃，然后再冻干24‑48小时，即得重组转氨酶，所述的反应在pH为6.0‑9.0的水相缓冲液中进行。
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