[发明专利]一种改进的海带染色体的制备方法有效

专利信息
申请号: 201210232823.8 申请日: 2012-06-26
公开(公告)号: CN102703599A 公开(公告)日: 2012-10-03
发明(设计)人: 田萍萍;崔翠菊;张立楠;李晓捷;罗世菊;赵楠;宋少峰;赛珊;盛宝利;彭伟;吴家奇;邵伟 申请(专利权)人: 山东东方海洋科技股份有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 264003 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明公开一种改进的海带染色体的制备方法,其步骤是:海带配子体离心后吸除多余水分保留海带配子体沉淀,加入秋水仙素溶液摇匀静置;海带配子体用氯化钾溶液低渗;低渗后的海带配子体用卡诺固定液固定;用纤维素酶R-10溶液、果胶酶溶液、离析酶R-10溶液的混合酶液酶解去壁;海带配子体离心后用移液枪吸除上清液,加入冰乙酸混匀成细胞悬液,用滴管吸取细胞悬液在离预冷的载玻片的上面滴片,载玻片底面经过酒精灯火焰烧一次后自然晾干或烘干;对附着在载玻片上的海带配子体染色体采用姬姆萨染色液染色;显微镜下观察和拍照。本发明得到染色体分散较好,形态可辨且可数的染色体分裂相,方法简便快速,可重复性强,一般实验室均可操作。
搜索关键词: 一种 改进 海带 染色体 制备 方法
【主权项】:
一种改进的海带染色体的制备方法,其步骤是:(1)海带配子体预处理:海带配子体离心后吸除多余水分保留海带配子体沉淀,并加入秋水仙素溶液振荡摇匀静置;(2)海带配子体低渗:海带配子体用氯化钾溶液低渗;(3)海带配子体固定:低渗后的海带配子体用卡诺固定液进行固定;(4)酶解去壁:用纤维素酶R‑10溶液、果胶酶溶液、离析酶R‑10溶液的混合酶液进行酶解去壁;(5)冷滴片:酶解去壁后的海带配子体离心后用移液枪吸除上清液,加入冰乙酸,振荡混匀成细胞悬液,用滴管吸取细胞悬液在离预冷的载玻片的上面滴片,载玻片底面经过酒精灯火焰烧一次后自然晾干或烘干;(6)姬姆萨染色:对附着在载玻片上的海带配子体染色体采用姬姆萨染色液进行染色;(7)显微镜下观察和拍照。
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