[发明专利]一种检测Leber病调控子的试剂盒及用途

摘要

本发明提供一种检测Leber病调控子相关的线粒体DNA突变的试剂盒，由引物序列、提取样本基因组DNA的试剂、PCR扩增反应试剂、阳性标本对照、阴性标本对照以及使用说明书构成，限制性内切酶包括限制性内切酶NlaⅢ；阳性标本对照是含有线粒体序列第4435位点发生A>G突变的酶切样本。本发明的试剂盒可在检测与Leber病调控子相关的线粒体基因mtDNAA4435G突变中的应用。本发明可确保检测结果的特异性和稳定性，成本较其他检测方法更低，是检测流程简便、快速，准确、经济的LHON相关基因突变检测方法。

主权项

一种检测Leber病调控子相关的线粒体DNA突变的试剂盒，由引物序列、提取样本基因组DNA的试剂、PCR扩增反应试剂、阳性标本对照、阴性标本对照以及使用说明书构成；其中，提取样本基因组DNA的试剂由细胞裂解液和主要成分是蛋白酶K的溶液Ⅰ组成；PCR扩增反应试剂包括dNTP、10×PCR缓冲液、MgCl2、三蒸Taq水和酶；引物序列是：外前向引物F: TGG CTC CTT TAA CCT CTC CA，外反向引物R: AAG GAT TAT GGA TGC GGT TG；内前向引物F: CCT ACC ACT CAC CCT AGC AT，内反向引物R: AAT CAG TGC GAG CTT AGC GC；限制性内切酶包括限制性内切酶NlaⅢ；阳性标本对照是含有线粒体序列第4435位点发生A>G突变的酶切样本、阴性标本对照是不含有线粒体序列第4435位点发生A>G突变的酶切样本。