[发明专利]环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法无效
申请号: | 201210090007.8 | 申请日: | 2012-03-30 |
公开(公告)号: | CN102605087A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 曹冶;王秋实;廖党金;赵素君;李江凌;谢晶;罗丹丹;叶勇刚 | 申请(专利权)人: | 四川省畜牧科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12R1/19;C12R1/42;C12R1/445;C12R1/46;C12R1/01 |
代理公司: | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人: | 成实 |
地址: | 610000 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法,本发明主要由以下步骤构成:(1)获得样本;(2)过滤:将样本用双蒸水混匀后过滤,过滤后的液体再用滤纸过滤,得到过滤液;(3)离心:将过滤液于8500×g~12000×g的离心条件下离心;(4)洗涤:离心后的沉淀用磷酸盐缓冲液洗涤;(5)稀释:采用磷酸盐缓冲液对洗涤后的沉淀进行稀释,稀释后菌液浓度不小于1.5×103CFU/ml;稀释后的菌液即进行PCR检测。本发明具有无需经过DNA提取即可进行PCR检测、可减少检测所需时间、简化检测步骤、提高PCR检测效率等优点。 | ||
搜索关键词: | 环境 常见 微生物 pcr 检测 技术 处理 方法 | ||
【主权项】:
环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法,其特征在于,主要由以下步骤构成:(1)获得样本;(2)过滤:将样本用双蒸水混匀后过滤,过滤后的液体再用滤纸过滤,得到过滤液;(3)离心:将过滤液于8500×g~12000×g的离心条件下离心;(4)洗涤:离心后的沉淀用磷酸盐缓冲液洗涤;(5)稀释:采用磷酸盐缓冲液对洗涤后的沉淀进行稀释,稀释后菌液浓度不小于1.5×103CFU/ml;稀释后的菌液即进行PCR检测。
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