[发明专利]环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法无效
| 申请号： | 201210090007.8 | 申请日： | 2012-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN102605087A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 曹冶;王秋实;廖党金;赵素君;李江凌;谢晶;罗丹丹;叶勇刚 | 申请（专利权）人： | 四川省畜牧科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12R1/19;C12R1/42;C12R1/445;C12R1/46;C12R1/01 |
| 代理公司： | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人： | 成实 |
| 地址： | 610000 *** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 环境 常见 微生物 pcr 检测 技术 处理 方法 | ||
【权利要求书】：
1.环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法，其特征在于，主要由以下步骤构成：
（1）获得样本；
（2）过滤：将样本用双蒸水混匀后过滤，过滤后的液体再用滤纸过滤，得到过滤液；
（3）离心：将过滤液于8500×g～12000×g的离心条件下离心；
（4）洗涤：离心后的沉淀用磷酸盐缓冲液洗涤；
（5）稀释：采用磷酸盐缓冲液对洗涤后的沉淀进行稀释，稀释后菌液浓度不小于1.5×103CFU/ml；稀释后的菌液即进行PCR检测。
2.根据权利要求1所述的环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法，其特征在于：所述常见微生物为革兰氏阴性菌、葡萄球菌、链球菌或菌肺炎双球菌。
3.根据权利要求2所述的环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.05M～0.2M。
4.根据权利要求3所述的环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法，其特征在于：所述样本采自养殖场环境中。
5.根据权利要求2或3或4所述的环境中常见微生物PCR检测技术的前处理方法，其特征在于：所述步骤（5）中稀释后菌液浓度不小于3.12×103CFU/ml。
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