[发明专利]全细胞生物合成脱氧核苷三磷酸的新技术无效
| 申请号： | 201019026027.7 | 申请日： | 2010-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN101768617A | 公开（公告）日： | 2010-07-07 |
| 发明（设计）人： | 应汉杰;姚月兰;熊健;陈勇;柏建新;苑巍;张磊 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学;南京同凯兆业生物技术有限责任公司 |
| 主分类号： | C12P19/40 | 分类号： | C12P19/40;C12R1/645;C12R1/85;C12R1/84;C12R1/78 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210009*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种全细胞生物合成脱氧核苷三磷酸的新技术，是以脱氧核苷一磷酸dNMP和磷酸根离子为底物，以糖为能量供体，利用有透性的酵母细胞，在化学效应物质的存在下反应来制备脱氧核苷三磷酸。本发明通过运用全细胞催化和代谢工程的原理，采用化学效应物质调控代谢流量，建立了高效的能量自耦联和再生系统，最终实现脱氧核苷三磷酸的高效制备。本发明克服了传统脱氧核苷三磷酸生产工艺的不足，具有工艺简单、转化率高、成本低，以及污染小等特点。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞 生物 合成 脱氧 核苷 磷酸 新技术 | ||
【主权项】：
一种全细胞生物合成脱氧核苷三磷酸的新技术，其特征在于以脱氧核苷一磷酸和磷酸根离子为底物，以糖为能量供体，利用有透性的酵母细胞，在化学效应物质的存在下建立高效的能量自耦联和再生系统来制备脱氧核苷三磷酸。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京工业大学;南京同凯兆业生物技术有限责任公司，未经南京工业大学;南京同凯兆业生物技术有限责任公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201019026027.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种教师用备课笔记本电脑
- 下一篇：一种用于炉膛换热管检修的焊接方法
- 同类专利
- 酿酒酵母基因工程改造提高S-腺苷-L-蛋氨酸产量的方法-201510692030.8
- 徐志南;赵伟军;杨修亮;杭宝建;黄磊;李江涛;蔡谨 - 山东金城生物药业有限公司;浙江大学
- 2015-10-23 - 2019-08-13 - C12P19/40
- 本发明公开了一种酿酒酵母基因工程改造提高S‑腺苷‑L‑蛋氨酸产量的方法，先利用一步基因置换法将酿酒酵母菌株染色体上一条GLC3（糖原支链酶基因）等位基因替换成G418抗性基因，然后通过孢子分离方法得到只含有GLC3基因被替换的单倍体，从而得到GLC3基因突变了的纯合子。通过10L和500L发酵罐发酵验证，突变菌株生产腺苷蛋氨酸产量分别达到了7.93g/L和8.35g/L，比原始菌株提高了15.1%和24.7%。
- 微生物转化制备咖啡因的方法-201810085392.4
- 刘轩 - 德州翔煊医药科技有限公司
- 2018-01-29 - 2019-08-06 - C12P19/40
- 本发明提供了一种微生物转化制备咖啡因的方法，微生物转化的反应体系中以不含咖啡因的城市绿化废弃物和农作物废弃物作为底物，以间型散囊菌(Eurotium intermedium,CGMCC 3.4318)、谢瓦散囊菌(Eurotium chevalieri,CGMCC 3.6492)、冠突散囊菌(Eurotium cristatum,CGMCC 3.0448)、阿姆斯特丹散囊菌(Eurotium amstelodami,CGMCC 3.6518)、蜡叶散囊菌(Eurotium herbarioum,CGMCC 3.6496)中的单一或多种混合菌种作为微生物转化菌种，转化条件为15℃～45℃的温度下培养1～15天。本发明提供了微生物转化制备咖啡因的方法，解决了现有技术中制备咖啡因过程所加入溶剂和催化剂容易残留有害物质，并且使用设备昂贵、工艺繁琐、成本高的技术问题。
- 提高S－腺苷蛋氨酸和谷胱甘肽发酵产量的方法-201611001506.X
- 王大慧;王清;徐若烊;卫功元 - 苏州大学
- 2016-11-10 - 2019-06-28 - C12P19/40
- 本发明涉及一种提高S－腺苷蛋氨酸和谷胱甘肽发酵产量的方法，包括以下步骤：将外源性的表达ATP6基因的片段导入酵母菌株中，得到重组酵母菌株，将重组酵母菌株进行发酵培养后得到S－腺苷蛋氨酸和谷胱甘肽。本发明采用重组DNA技术，将ATP6基因整合至产朊假丝酵母(Candida utilis CCTCC M 209298)基因组中，提高了线粒体中ATP合成酶的活性，促进ATP再生，为胞内SAM和GSH的生物合成提供充足的ATP，并最终实现SAM和GSH联合高产。
- 一种提高S-腺苷蛋氨酸和谷胱甘肽联产发酵产量的方法-201610519265.1
- 卫功元;黎德超;王大慧 - 苏州大学
- 2016-07-05 - 2019-05-24 - C12P19/40
- 本发明涉及一种提高S‑腺苷蛋氨酸和谷胱甘肽联产发酵产量的方法，该方法采用基因敲除技术敲除产朊假丝酵母的线粒体膜上的膜孔蛋白基因，提高线粒体膜通透性，促进NADH进入线粒体，增强通过呼吸链合成ATP的效率，最终实现酵母胞内SAM和GSH联产产量的提高。本发明的方法为真核细胞内类似耗能好氧合成化合物的高产提供了新的思路。
- 一种虫草素的合成方法-201811483813.5
- 陈剑清;吕雅雯;朱俊德;盖其静 - 杭州科迪赛生物科技有限公司
- 2018-12-06 - 2019-04-16 - C12P19/40
- 本发明公开的是一种虫草素的合成方法，该方法包括采收成熟蛹虫草子实体，用液氮速冻后快速研磨成粉；加入提取缓冲液，搅拌提取、离心，取上清液用超滤膜截留浓缩；用提取缓冲液稀释置换截留液，浓缩获得酶混合液；向酶混合液中加入底物混合液，得到酶反应体系；将酶反应体系放于适宜温度下反应得到虫草素，本发明合成方法避免了培养蛹虫草子实体的漫长时间，菌种不易污染，发酵时间短；合成成分简单，纯化方法简单；实现了虫草素的体外仿生合成；绿色无污染，安全健康；酶反应混合物可以重复利用，避免浪费；成本低廉，易于推广。
- 一种合成虫草素的混合液-201811483831.3
- 陈剑清;吕雅雯;朱俊德;盖其静 - 杭州科迪赛生物科技有限公司
- 2018-12-06 - 2019-03-19 - C12P19/40
- 本发明公开的是一种合成虫草素的混合液，该混合液包括如下组分：底物混合溶液、酶反应混合溶液，所述底物混合液和酶混合液的体积比为1:0.5‑2，底物混合溶液包括醋酸钾、醋酸镁、μM氯化铁、mM DTT、腺苷、ADP、ATP、dATP、HEPES‑KOH，酶反应混合溶液：a)收集成熟蛹虫草子实体，用液氮速冻后快速研磨成粉；b)加入提取缓冲液，搅拌提取得到预提取液；c)将预提取缓冲液置于离心机内，离心，取上清液并用超滤膜截留浓缩，去滤液；d)用提取缓冲液稀释置换截留液，浓缩获得酶反应混合溶液，本发明具有反应时间短，合成成分简单，对设备要求低等技术特点。
- 虫草素的合成基因簇的鉴定和应用-201410425608.9
- 王成树;夏永亮;商艳芳 - 中国科学院上海生命科学研究院
- 2014-08-26 - 2019-01-25 - C12P19/40
- 本发明涉及蛹虫草代谢产物——虫草素的合成基因簇的鉴定和应用。首次找到了虫草素生物合成的基因簇，该基因簇包括Cm1和Cm2和/或Cm3，对应构巢曲霉中的同源基因分别是An1、An2和/或An3。基于上述新发现，本发明揭示一种能够实现高效的虫草素生物合成的方法。
- 水稻糖基转移酶Os6的用途-201811101467.X
- 李攀;冀芦莎 - 聊城大学
- 2018-09-20 - 2019-01-04 - C12P19/40
- 本发明提供水稻糖基转移酶Os6的用途，为用于调节细胞分裂素糖苷合成或用于制备细胞分裂素糖苷合成调节剂。本发明的公开为体外利用酶催化方法合成这些细胞分裂素物质的糖苷物提供了可行的方法。用糖基转移酶Os6催化方法则可以高效、专一性的合成6‑苄氨基腺嘌呤（6‑BA）糖苷和反式玉米素（TZ）糖苷。对进行植物生长或细胞分裂素功能测试等相关实验或生产活动起到重要作用。
- 一种核苷类药物中间体2’-脱氧鸟苷的生产方法-201510140553.1
- 李竹;谌京梅 - 乐山市瑞和祥生物制药有限公司
- 2015-03-30 - 2018-07-27 - C12P19/40
- 本发明属于生物技术领域，涉及生物催化法制备2’‑脱氧鸟苷的技术领域，具体为一种核苷类药物中间体2’‑脱氧鸟苷的生产方法，该方法，以β‑胸苷和鸟嘌呤为原料，采用发酵乳杆菌菌体浆状物为生物催化剂，在聚乙二醇10000/磷酸氢二钾双水相系统下进行生物催化反应，得到2’‑脱氧鸟苷产物。在最优化条件下，底物β‑胸苷加入量达到16.5g/L，胸苷转化率达89％，产物2’‑脱氧鸟苷达16.1g/L。
- 一种制备S-腺苷蛋氨酸的方法-201510149807.6
- 金志华;胡升;梅乐和;金庆超;吴志革;杨郁;尚龙安 - 浙江大学宁波理工学院
- 2015-03-31 - 2018-06-26 - C12P19/40
- 本发明公开了一种制备S‑腺苷蛋氨酸的方法，包括：以D/L‑蛋氨酸为原料，发酵获得S‑腺苷蛋氨酸，往发酵液中添加柠檬酸和磷酸盐。本发明将柠檬酸和磷酸盐添加入发酵液中，使菌株利用柠檬酸和磷酸盐合成ATP，在保证不显著提高原料成本的情况下，解决了现有技术中S‑腺苷蛋氨酸产量因胞内ATP浓度低造成的产物产量低的问题，显著提高了S‑腺苷蛋氨酸产量和L‑蛋氨酸的转化率。
- 一种提高蛹虫草液体生产虫草菌素的方法-201611058384.8
- 王弘 - 辽宁弘侨生物科技股份有限公司
- 2016-11-27 - 2018-06-05 - C12P19/40
- 本发明属于虫草制备技术领域，涉及一种提高蛹虫草液体生产虫草菌素的方法。一种提高蛹虫草液体生产虫草菌素的方法，步骤如下：将马铃薯煮熟过滤取汁，再将葡萄糖10‑15g，蔗糖15‑18g，硫酸镁 0.5‑1.0g，硫酸钾1‑2g，蛋白胨2‑3g，酵母膏0.5‑1g，琼脂18‑20g，茧蛹汁200‑300ml，和水800‑1000mL 与马铃薯汁混合均匀配制成菌种活化培养基；配制得母种培养基；加入腺嘌呤和腺苷配制液体发酵基础培养基；在菌种活化培养基中无菌接入蛹虫草菌种，在温度为25‑35℃静置1‑1.5d，放入振荡培养箱培养；将液体菌种接种于灭菌后的母种培养基中培养3‑5d，再放入液体发酵基础培养基中培养8‑10d中培养，即得成品，本发明制备方法采用添加腺嘌呤和腺苷的混合添加物，加入液体培养基能提高虫草素产量并且操作简单。
- 提高虫草菌素含量的蛹虫草‑杜仲液体发酵方法及应用-201710953940.6
- 梁建东;田维毅;王平;陈万浩;徐丽丽;柴宇航;张鑫;杨长福;蔡琨;曹峰;王文佳;俞琦;段学清;孙成龙;陈瑞;李玉平 - 贵阳中医学院
- 2017-10-13 - 2018-01-16 - C12P19/40
- 本发明提供一种提高虫草菌素含量的蛹虫草‑杜仲液体发酵方法及应用，提高虫草菌素含量的蛹虫草‑杜仲液体发酵方法包括以下步骤（1）菌种活化；（2）液体基础培养基制备；（3）液体发酵培养基制备；（4）液体发酵的条件控制及产物处理。本发明将杜仲与蛹虫草共培养，并获取培养物，操作简便，结果良好，大大提高了发酵产物中虫草菌素的含量，同时保留有杜仲的有效成分，提供具有增强免疫、强筋骨、益精气、降三高等功效以及具有开发保健食品和药品潜力的发酵产物，具有较好的经济和社会价值。
- 一种利用大肠埃希氏菌转化生产2′‑脱氧腺苷的方法-201410387566.4
- 张春颖;杨旭锦 - 西藏天虹科技股份有限责任公司
- 2014-08-08 - 2017-12-12 - C12P19/40
- 本发明公开了一种利用大肠埃希氏菌转化生产2′‑脱氧腺苷的方法，通过直接采用具有高核苷磷酸化酶活性的大肠埃希氏菌菌体作为酶源，将其与作为转化反应底物的脱氧胸腺嘧啶核苷及腺嘌呤混合进行转化反应合成2′‑脱氧腺苷，具有工艺简单、转化率高、生产成本低、反应条件温和的优点，且副产物少，绿色无污染，产物易分离纯化。本发明中腺嘌呤转化率达到72.5％以上。另外，通过采用结晶及重结晶的方法分离纯化2′‑脱氧腺苷，使2′‑脱氧腺苷的纯度达到99％以上。
- 一种虫草素发酵固体培养基及其制备方法与应用-201510233106.0
- 汤佳鹏 - 南通大学
- 2015-05-08 - 2017-09-05 - C12P19/40
- 本发明公开了一种虫草素发酵固体培养基及其制备方法和应用，该培养基由如下步骤制备得到1)将葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硫酸镁、吐温80，溶剂为水，充分搅拌溶解后调节溶液pH值5.5～6.0，制得发酵培养液；2)将步骤1)中的发酵培养液与膨胀珍珠岩混合均匀，经喷雾干燥后装入发酵罐，121℃蒸汽灭菌20min，获得虫草素发酵固体培养基。本方法所提供的子实体量大，同步性佳，活力强，并通过喷淋补加虫草素前体腺嘌呤和三油酸甘油酯促进蛹虫草的生长与虫草素的积累，能够提高虫草素的产量和质量。
- 一种通过流加骨蛋白胨提高腺苷产量的方法-201610838645.1
- 胡丽芳;黄名燕;余宇坚 - 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司;肇东星湖生物科技有限公司
- 2016-09-21 - 2017-03-08 - C12P19/40
- 本发明提供一种通过流加骨蛋白胨提高腺苷产量的方法。该方法以枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SL03为生产菌株，包括菌种斜面培养、种子培养和发酵培养的过程，所述的发酵培养是指分批流加骨蛋白胨发酵培养。即在产苷阶段流加补充氮源骨蛋白胨，大大提高了腺苷发酵的产量。随着发酵过程的进行，发酵培养基中氮源浓度降低，菌体生长和产苷条件变化，利用本发明中的流加方法，可以一定程度上维持氮源的充足，产量较对比例提高8.3％‑20％，发酵周期由原来的50h缩短至42h。
- 一种从蛹虫草发酵液中提取虫草素的方法-201611015213.7
- 肖军;肇莹 - 辽宁省农业科学院
- 2016-11-18 - 2017-02-22 - C12P19/40
- 本发明涉及一种从蛹虫草发酵液中提取虫草素的方法，蛹虫草作为产虫草素的主要菌株，其液态深层发酵液中虫草素的含量要比菌丝体及其子实体中的高。本发明优化了发酵培养基配方，使蛹虫草发酵液中虫草素含量达到1g/L以上。通过大孔吸附树脂对发酵液中的虫草素进行提取，提供大孔树脂H103对发酵液中虫草素的吸附及解吸条件，可以得到较好的分离纯化效果，吸附率达到90%以上。利用蛹虫草发酵液提取虫草素发酵周期短、可控性好、虫草素含量高、同时大孔吸附树脂可以重复利用，因此适合工厂化生产。
- 一种通过流加混合氮源提高腺苷产量的方法-201611024129.1
- 谢畅丰;余宇坚;胡丽芳;黄名燕 - 肇东星湖生物科技有限公司;广东肇庆星湖生物科技股份有限公司
- 2016-11-17 - 2017-02-15 - C12P19/40
- 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种通过流加混合氮源提高腺苷产量的方法。该方法包括菌种斜面培养、种子培养和发酵培养的过程，所述的发酵培养包括菌体吸光度OD值达到0.5～0.6时，开始匀速流加酵母膏和玉米浆粉混合氮源的过程，两种氮源以1(2±0.5)的重量比例混合。该方法通过在发酵中后期匀速补入氮源，为菌体生长和发酵产苷提供了营养物质，保持了发酵中后期的活力和稳定性，增加了发酵产量，最终提高了糖苷转化率。
- 一种酶催化法腺苷甲硫氨酸的制备方法-201610756400.4
- 付大雁;曲智慧;李岩;侯建华 - 北京凯因科技股份有限公司
- 2016-08-29 - 2016-12-07 - C12P19/40
- 本发明涉及一种酶催化生产腺苷甲硫氨酸(或称腺苷蛋氨酸)的方法，通过将SAMe合成酶制备形成交联酶聚集体，形成不溶于水的固定化酶，以此方法制备固定化酶催化ATP和蛋氨酸，合成腺苷蛋氨酸，合成速度快，反应大约3小时即可完成，合成量高，催化性能稳定，60次转化力不下降。
- 一种提高蛹虫草液体发酵生产虫草菌素产量的方法-201610578793.4
- 张楠;段辉国;唐正义;黎勇;徐洁;熊茂;雷雨田 - 内江师范学院
- 2016-07-21 - 2016-12-07 - C12P19/40
- 本发明公开了一种提高蛹虫草液体发酵生产虫草菌素产量的方法，包括菌种活化、蛹虫草菌种制作、蛹虫草培养，液体菌种制作的过程中采用孢子浓度3.0×108CFU/mL或者4‑5块菌饼时制作的母种作为蛹虫草菌种扩大培养中的一级种子液；蛹虫草培养过程中采用的发酵培养基包含葡萄糖25g/L，土豆100g/L，鱼蛋白胨18g/L，(NH4)2SO4 0.8g/L，KH2PO4 1.0g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，蚕蛹粉5.0g/L，VB1 18mg/L，水1L。通过本发明蛹虫草生物量提高了74.51％，虫草菌素总产量提高了238.52％。本发明对蛹虫草生物量和蛹虫草产虫草素能力有显著的促进作用。
- 一种蛹虫草液体培养基及蛹虫草的培养方法-201510356495.6
- 郭狄 - 中山鼎晟生物科技有限公司
- 2015-06-25 - 2015-11-11 - C12P19/40
- 本发明涉及一种蛹虫草液体培养基，所述的培养基包括由以下含量的各组分组成：KH2PO4 1-3g/L，MgSO4 1-3g/L，氮源5-20g/L，马铃薯200-500g/L，D-果糖8-15 g/L，琼脂20-50 g/L，碱性氨基酸10-25 g/L，酸性氨基酸8-20 g/L，蚕蛹粉30-50g/L。所述的液体培养基将碳源限定为D-果糖，培养基中还添加碱性氨基酸及酸性氨基酸，采用该液体培养基进行蛹虫草的培养，可明显提高蛹虫草的产量，也可显著提高其中虫草素的产量，生产周期短，而且后续虫草素提取分离方便，适于工业化大生产。
- 一种高NAD积累量发酵液的生产方法-201510424725.8
- 王康林;杨培周;金永红;杨杨 - 合肥平光制药有限公司
- 2015-07-16 - 2015-11-04 - C12P19/40
- 本发明公开了一种高NAD积累量发酵液的生产方法，包括如下步骤：S1、制备豆粕蛋白溶出物；S2、制备甘薯糖化液；S3、发酵：将豆粕蛋白溶出物与甘薯糖化液混匀得到溶液A，加入维生素复合液混匀得到溶液B，灭菌，冷却至室温，加入发酵菌种，升温至28-34℃，保温48-60h得到高NAD积累量发酵液。本发明大大增加了发酵液中NAD的积累量，NAD的积累量达到4.7-6.4g/l，原料廉价易得，成本低，操作简单，适合工业化生产。
- 一种NAD发酵液的生产方法-201510423670.9
- 王康林;杨培周;金永红;杨杨 - 合肥平光制药有限公司
- 2015-07-16 - 2015-11-04 - C12P19/40
- 本发明公开了一种NAD发酵液的生产方法，包括如下步骤：S1、制备福寿螺软组织蛋白溶出物：将福寿螺软组织碎末和枯草杆菌中性蛋白酶溶液混匀，酶解，过滤，取上清液干燥得到福寿螺软组织蛋白溶出物；S2、制备木薯糖化液：将木薯粉与水混匀，加α-淀粉酶进行液化后，加糖化液进行糖化得到木薯糖化液；S3、发酵：将福寿螺软组织蛋白溶出物与木薯糖化液混匀得到溶液A，加入维生素复合液混匀得到溶液B，灭菌，冷却至室温，加入发酵菌种，升温至28-32℃，保温36-48h得到NAD发酵液。本发明大大增加了发酵液中NAD的积累量，NAD的积累量达到4.5-6.5g/l，原料廉价易得，成本低，操作简单，适合工业化生产。
- 大米或小麦虫草培养基残基生物转化为水溶性食品的方法-201510234177.2
- 岳龙龙;岳旭勤;岳阳华 - 岳龙龙
- 2015-05-08 - 2015-08-26 - C12P19/40
- 本发明公开了本发明涉及一种大米或小麦虫草培养基残基生物转化为水溶性食品的方法，利用长过虫草菌丝体的大米或小麦虫草培养基的残基通过加入生物酶转化的方法，将培养基残基转化成可溶性的粉末状食品，可直接食用，本发明制备的可溶性食品未使用任何化学制剂来提取，安全性高，并且本发明对虫草培养基中的腺苷、多糖等多种营养成分起到了充分利用，本发明变废为宝，成本相对于现有技术的虫草素的提取更加低廉，能够广泛应用和规模化大生产，具备良好的市场前景和经济效益。
- 中间补料发酵生产环磷酸腺苷的方法-201110210858.7
- 应汉杰;李磊;陈晓春;柏建新;陈勇;吴菁岚;谢婧婧 - 南京工业大学
- 2011-07-26 - 2015-01-28 - C12P19/40
- 本发明提供一种中间补料发酵生产环磷酸腺苷的方法。本发明提供的发酵生产环磷酸腺苷的方法采用间歇匀速补料的方式分批发酵生产环磷酸腺苷，发酵菌株为保藏编号为CGMCC No.3584的节杆菌，在发酵的指数期之后，以每隔3～10h间歇匀速流加补料碳源，共流加4～10次。本发明提供的方法优点在于，在整个培养过程中，碳源浓度较低，而且发酵结束基本被耗尽，在减少反馈抑制的同时，使环磷酸腺苷产量有较大幅的提高。
- 一种樟芝菌中腺苷的提取方法-201410471596.3
- 刘巴宁;郑安乔 - 中山安荞生物科技有限公司
- 2014-09-17 - 2014-12-17 - C12P19/40
- 本发明涉及一种樟芝菌中腺苷的提取方法。所述的提取方法包括以下步骤：先将樟芝菌接种于PDA培养基中进行菌种活化，再将活化后的樟芝菌接种于液体种子培养基中，摇床培养得到摇床培养后的樟芝菌摇床培养，再取2%-5%的摇床培养后的樟芝菌接种于发酵罐中培养，得到深层发酵后的樟芝菌发酵液，最后制备樟芝菌菌丝体干粉，并将其溶于加有有机溶剂的水中在40-50℃的恒温水浴锅里浸提40-60min，离心取沉淀用水洗涤，取洗涤液即为腺苷的提取液。本发明中先对样品进行预处理，在有机溶剂提取时，将提取温度控制在40-50℃，提取时间控制在40-60min,大大缩短了提取时间，同时也使腺苷提取率明显增加，还能维护腺苷结构的稳定性。
- 一种利用酵母菌发酵生产腺苷蛋氨酸的方法-201410385463.4
- 张春颖;张丽云 - 西藏金稞集团有限责任公司
- 2014-08-06 - 2014-11-05 - C12P19/40
- 本发明公开了一种利用酵母菌发酵生产腺苷蛋氨酸的方法，通过改善种子培养基和发酵培养基配方，并在特定时间添加蔗糖和前体L-蛋氨酸，使酵母菌发酵产生大量的腺苷蛋氨酸，腺苷蛋氨酸的发酵水平可达到16g/L以上，生物量干重达到170g/L以上。另外，通过加入三氯乙酸进行破壁，使细胞壁破碎率达到99％以上，从而使腺苷蛋氨酸得到充分释放。通过采用苦味酸对腺苷蛋氨酸进行提取，使腺苷蛋氨酸的沉淀得率在95％以上。通过萃取及树脂脱色等步骤，使腺苷蛋氨酸产品纯度大于98％。本发明具有生产工艺简单、生产成本低、过程易控制且无污染、腺苷蛋氨酸得率高且质量稳定等优点，适合腺苷蛋氨酸的大规模工业化生产。
- 一种通过调控基因表达来提高S-腺苷甲硫氨酸产量的方法-201410299274.5
- 钱江潮;陆俊杰;乔雪锋;秦秀林;储炬;庄英萍;张嗣良 - 华东理工大学
- 2014-06-26 - 2014-09-10 - C12P19/40
- 本发明涉及一种通过调控基因表达来提高S-腺苷甲硫氨酸产量的方法。首次揭示将透明颤菌血红蛋白(VHb)的编码基因转入S-腺苷甲硫氨酸生产菌株，并敲除S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶spe2基因后，能够显著地提高S-腺苷甲硫氨酸生产菌株的S-腺苷甲硫氨酸产量。
- 一种生物合成腺苷蛋氨酸的方法-201410163487.5
- 朱家荣;郑计瑞;陈丽芬;杨善岩 - 浙江工业大学
- 2014-04-22 - 2014-08-20 - C12P19/40
- 本发明公开了一种腺苷蛋氨酸的合成方法，所述方法为：将腺苷蛋氨酸工程菌经发酵培养获得的发酵液过滤，取湿菌体在60～65℃干燥2～3h进行活化处理，获得的活化菌体加入腺嘌呤、葡萄糖、磷酸盐、硫酸盐、蛋氨酸和水构成反应体系，在33～37℃条件下进行转化反应，反应结束，获得的反应液即为含腺苷蛋氨酸的混合液；本发明构建了SAM工程菌，使用该菌种可以在已有腺嘌呤合成ATP反应液中添加蛋氨酸，从而省去了SAM合成酶的菌种培养、SAM合成酶的提取以及在反应中添加SAM合成酶等操作，使生产更为简便；腺嘌呤等原料都可以从市场大量较低价购得，利用本发明方法可以高效、大规模合成SAM。
- 一种鸟苷的生产方法-201410141404.2
- 何峰;何谧;刘守德;田洪敏;李和;项磊;刘幸 - 湖北普信工业微生物应用技术开发有限公司
- 2014-04-09 - 2014-06-25 - C12P19/40
- 本发明公开了一种鸟苷的生产方法，包括以下步骤：（1）将种子液按照体积比例12%至18%接入发酵罐，流加氨水控制pH值在6.5至7.0之间；（2）发酵对数生长期，控制发酵温度在36至38摄氏度之间，分批次添加氮源，维持其质量比例在0.15%至0.35%之间；（3）发酵稳定期，控制发酵温度在34至36.5摄氏度之间，按照质量比例添加0.1%至0.3%核苷类似物和0.1%至0.3%的6-磷酸葡萄糖脱氢酶激活剂；（4）发酵衰亡期，控制发酵温度在36至38摄氏度之间；（5）发酵结束后，从发酵液中提取鸟苷。本发明提高了发酵法生产鸟苷的产量，缩短了发酵时间，从而大幅提高鸟苷产率，具有重要的工业应用价值。
- 一种苏芸金素的提取方法-201210450202.7
- 杨玉焕 - 东北林业大学
- 2012-11-12 - 2014-05-21 - C12P19/40
- 一种苏芸金素的提取方法，将苏芸金芽孢杆菌活化——培养——双水相萃取法提取得到含有苏芸金素的溶液的工艺路线。本发明是一种操作简便，生产成本低，提取过程中无环境污染、无有机溶剂残留，得到苏芸金素的生产工艺。
- 专利分类
