[发明专利]鸡FSHR基因5′调控区两个突变位点的分子标记方法及其在鸡育种中的应用

摘要

本发明涉及分子遗传学领域，具体涉及了一种鸡FSHR基因5′调控区突变位点的分子标记方法及其育种中的应用，发明人发现鸡FSHR 5′调控区-237和-868位点进行单个位点标记分析时，两位点均未发现与性状相关，但用两位点单倍型构建双倍型进行多重比较时，结果发现TTG+G-型对应较小的开产日龄(123d)，TTG+G+型对应较大的开产日龄(134d)，两者差异显著(P＝0.016)，可见检测这两个与产蛋性状相关联的分子标记，不仅方法简便快速，而且不受环境影响，并可实现早期选种。

主权项

鸡FSHR基因5′调控区两个突变位点的分子标记方法，具体标记方法是：采用标记引物P‑868，包括P‑868F，其序列如Seq ID No：1所示；P‑868R，其序列如Seq ID No：2所示；扩增鸡育种材料的基因组DNA，PCR扩增产物得到大小相差200bp的两个片段分别为1119bp的片段和919bp的片段，其序列分别如Seq ID No：3和Seq ID No：4所示，PCR产物在1.2％的琼脂糖凝胶电泳检测直接分出三种带型，200bp插入的记为G+G+型，200bp缺失的记为G‑G‑型，杂合子记为G+G‑型；采用标记引物P‑237，包括P‑237F，其序列如Seq ID No：5所示；P‑237R，其序列如Seq ID No：6所示；扩增鸡育种材料的基因组DNA，得到371bp的PCR扩增产物，其序列如Seq ID No：7所示，其中包含Ssp I限制性内切酶的识别序列“AAT/ATT”，当237“T”突变为“A”即“AAT/AAT”类型记做“AA”，扩增片段Ssp I内切酶切不开；“T”不发生突变类型记做“TT”，可以被Ssp I内切酶切作235bp和136bp的两条短片段；PCR产物被Ssp I限制性内切酶消化后用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测，即得到AA、TT、AT三种带型。