[发明专利]鸡FSHR基因5′调控区两个突变位点的分子标记方法及其在鸡育种中的应用有效
申请号: | 201010197885.0 | 申请日: | 2010-06-01 |
公开(公告)号: | CN102080126A | 公开(公告)日: | 2011-06-01 |
发明(设计)人: | 姜运良;康丽;张宁波;唐辉;张渝洁;刘东君;王慧;梁森;藏丽;李标 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 271018 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | fshr 基因 调控 两个 突变 分子 标记 方法 及其 育种 中的 应用 | ||
1.鸡FSHR基因5′调控区两个突变位点的分子标记方法,具体标记方法是:
采用标记引物P-868,包括
P-868F,其序列如Seq ID No:1所示;
P-868R,其序列如Seq ID No:2所示;
扩增鸡育种材料的基因组DNA,PCR扩增产物得到大小相差200bp的两个片段分别为1119bp的片段和919bp的片段,其序列分别如Seq ID No:3和Seq ID No:4所示,PCR产物在1.2%的琼脂糖凝胶电泳检测直接分出三种带型,200bp插入的记为G+G+型,200bp缺失的记为G-G-型,杂合子记为G+G-型;
采用标记引物P-237,包括
P-237F,其序列如Seq ID No:5所示;
P-237R,其序列如Seq ID No:6所示;
扩增鸡育种材料的基因组DNA,得到371bp的PCR扩增产物,其序列如Seq ID No:7所示,其中包含Ssp I限制性内切酶的识别序列“AAT/ATT”,当237“T”突变为“A”即“AAT/AAT”类型记做“AA”,扩增片段Ssp I内切酶切不开;“T”不发生突变类型记做“TT”,可以被Ssp I内切酶切作235bp和136bp的两条短片段;PCR产物被Ssp I限制性内切酶消化后用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测,即得到AA、TT、AT三种带型。
2.如权利要求1所述标记方法,其在鸡育种中的应用方法是:在产蛋数低或开产较晚的群体中,选择两位点单倍型组合为TTG+G-基因型的个体留种,用于提高该群体的产蛋数及适当提早开产日龄。
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