[发明专利]链霉亲和素标记的结合藻红胆素的别藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法有效
申请号: | 200810025746.2 | 申请日: | 2008-01-10 |
公开(公告)号: | CN101481699A | 公开(公告)日: | 2009-07-15 |
发明(设计)人: | 夏坤;佟顺刚 | 申请(专利权)人: | 广州天宝颂原生物科技开发有限公司 |
主分类号: | C12N15/60 | 分类号: | C12N15/60;C12N15/31;C12N15/52;C12N15/70;C12N15/65;C07K14/405 |
代理公司: | 广州市南锋专利事务所有限公司 | 代理人: | 刘 媖 |
地址: | 510663广东省广州市科学*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种链霉亲和素标记的结合藻红胆素的别藻蓝蛋白类荧光蛋白质的制备方法,是通过应用藻胆蛋白beta裂合酶催化藻红胆素(PEB)与链霉亲和素标记的别藻蓝蛋白类脱辅基蛋白共价结合,制备链霉亲和素标记的结合PEB的别藻蓝蛋白类荧光蛋白质;本发明的方法应用生物过程生产别藻蓝蛋白类荧光蛋白质,是一种环境友好的生产方法;别藻蓝蛋白类荧光蛋白质能应用于食品、保健与医药功能材料领域,特别是应用为生物和医学分子检测领域的荧光探针。 | ||
搜索关键词: | 亲和 标记 结合 藻红胆素 别藻蓝 蛋白 荧光 蛋白质 方法 | ||
【主权项】:
1. 一种链霉亲和素标记的结合藻红胆素的别藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法,其特征在于包括下述步骤:(1)用基因工程的方法,将beta裂合酶基因或其同源基因克隆于表达载体中,得到beta裂合酶表达质粒;(2)用基因工程的方法,将链霉亲和素基因和别藻蓝蛋白类脱辅基蛋白基因或其同源基因克隆于第二个表达载体中,得到链霉亲和素标记的脱辅基蛋白表达质粒;(3)用基因工程方法,将藻红胆素生物合成酶基因hol和pebB或其同源基因克隆于第三个表达载体中,得到hol和pebB表达质粒;(4)用基因工程方法,将藻红胆素生物合成酶基因pebA或其同源基因克隆于第四个表达载体中,得到pebA表达质粒;(5)将beta裂合酶表达质粒、链霉亲和素标记的脱辅基蛋白表达质粒、hol和pebB表达质粒及pebA表达质粒依次转入配套的宿主菌,当这些表达质粒都转入宿主菌后,得到相应的工程菌,应用此工程菌通过发酵工程生产结合藻红胆素的别藻蓝蛋白类荧光蛋白质;发酵后,按常规蛋白质提纯技术,提纯得到相应的结合藻红胆素的别藻蓝蛋白类荧光蛋白质。
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- 伊日布斯;李卫娜;申冬玲;何漫漫;李曙梅;严金平 - 昆明理工大学
- 2015-04-13 - 2018-03-06 - C12N15/60
- 本发明公开了一种海藻酸裂解酶SHA‑I基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO1所示;本发明构建了海藻酸裂解酶基因SHA‑I的原核表达载体,该原核表达载体能够在较短时间内获得表达产物海藻酸裂解酶SHA‑I,且具有广泛的底物特异性,既能利用PolyM也能利用PolyG为底物,酶活达到13U/mg,是一种具有广泛应用前景的双功能酶,本发明原核表达载体和整体表达系统容易操作,便于工业化生产。
- ALS突变型基因及其蛋白和应用-201610225976.8
- 张保龙;陈天子;凌溪铁;王金彦 - 江苏省农业科学院
- 2016-04-12 - 2018-02-13 - C12N15/60
- 本发明公开了一种ALS突变型基因,其在水稻的ALS基因序列的第75位核苷酸由G变成核苷酸C;和/或第339位核苷酸由A变成核苷酸C;和/或第710位核苷酸由C突变为核苷酸T。本发明还公开了一种ALS突变型基因所编码的ALS蛋白及其应用。该蛋白来源于抗ALS抑制剂类除草剂的水稻突变体植株,与水稻野生型ALS序列相比,其蛋白序列在Gln25、Gln113或Ala237位点发生突变。绿色植物表达该蛋白序列可以抗(耐)乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂,特别是咪唑啉酮和磺酰脲类除草剂。
- 一种来自于阴沟肠杆菌的L‑苏氨酸醛缩酶及其应用-201510089583.4
- 张昕欣;于红艳;王玉新;吴翰桂 - 台州职业技术学院
- 2015-02-27 - 2018-02-02 - C12N15/60
- 本发明涉及一种从阴沟肠杆菌中分离的编码L-苏氨酸醛缩酶的核苷酸序列,它是具有SEQ ID NO1所示的核苷酸序列或该核苷酸序列的片段、类似物和衍生物。本发明包括编码L-苏氨酸醛缩酶的核苷酸序列与外源性调节序列连接,进行功能性表达的载体以及含有本发明载体的细胞生物体以及这类生物体的子代。用上述的核苷酸序列或多肽序列或含有本发明载体的细胞生物体以及这类生物体的子代制备L‑β‑羟基α‑氨基酸或D‑β‑羟基α‑氨基酸的方法。
- 一种糖胺聚糖裂解酶及其编码基因与应用-201510289566.5
- 生举正;王凤山;尹风新;薛佳俊 - 山东大学
- 2015-05-29 - 2018-01-12 - C12N15/60
- 本发明涉及一种糖胺聚糖裂解酶及其编码基因与应用。糖胺聚糖裂解酶的编码基因ssgaglyase,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;糖胺聚糖裂解酶SSGAGlyase,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的糖胺聚糖裂解酶SSGAGlyase能够选择性降解CS、HA、DS,且有较高的酶解活性,最终降解产物均为二糖,不能降解HP和HS。为系统的研究新型糖胺聚糖裂解酶提供参考,为糖胺聚糖的后续研究开发奠定了基础。
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