[发明专利]姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法

摘要

本发明属生物工程技术领域。具体涉及一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法。本发明的方法是将组织分离的姬松茸AB103菌株纯化后，采用物理法对其菌丝体进行诱变，经初筛和复筛后，获得液体发酵菌丝体生物量多、多糖肽产量高的优质菌株AB103－51。用天然玉米粉、麸皮、淀粉、酵母粉、玉米浆、硫酸镁、磷酸二氢钾等作为培养基，进行从斜面菌种，到摇瓶种子，一级种子、二级种子，到发酵培养的发酵工艺流程，获得含菌丝体及多糖肽较高的姬松茸发酵液。从AB103－51的菌丝体中，用热水提取，乙醇沉淀等方法，获得一种具有生物免疫调节剂作用的姬松茸多糖肽。

主权项

1、一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)姬松茸的育种与特征用组织分离法获得姬松茸纯菌株AB103，将其接种在PDA或麦芽汁固定斜面培养基上，于25～28℃恒温培养7～10天后，置于4℃左右的冰箱中保存备用，采用紫外诱变法对菌丝细胞进行诱变，紫外照射距离为20～30cm，照射时间为5～15秒，初筛诱变株在固体培养基上的菌丝体生长能力，复筛诱变株在液体培养基中菌丝体生长量和多糖肽产量，获得优质菌株AB103-51；固体培养用40～50％的稻草或木屑、棉子壳，1％的蔗糖或葡萄糖，10～20％麸皮或米糠，1％的石膏或碳酸钙，加水拌匀，含水量60％，PH自然，瓶装，在1.5kg/m2的压力下灭菌1小时同，冷却后，在无菌操作下摇瓶种子接种于固体培养基内，培养温度22～26℃，20～30天菌丝体布满全瓶，原基萌发后，降低栽培温度22～25℃，保持适当温度、光照和通风，30～40天后，子实体成熟；(2)菌株的发酵工艺流程本发明采用通气发酵法生产姬松茸菌丝体，发酵培养基成本低廉，发酵周期短，发酵工艺流程如下：斜面菌种或茄瓶菌种→摇瓶种子→50-100L3种子罐，一级→500-1000L3种子罐，二级→5000-10吨发酵罐，摇瓶种子的装量75～150ml/250ml或150～150ml/250ml培养基，往复式摇床振荡速度80～150次/分，或旋转式摇床振荡速度100～200转/分，培养温度100～200rpm，通气量1∶0.5～1∶1v/vmin，发酵培养时间4～7天，随着发酵培养时间延长，培养基由混浊逐渐变清，发酵液中还原糖、氨态氮、PH都逐渐降低，菌丝体生物量不断增加，至第5～6天时多糖肽产量；(3)姬松茸多糖肽的提取本发明所述姬松茸AB103-51的多糖肽提取工艺是：姬松茸发酵液用沙芯漏斗抽滤，分离发酵液和菌丝体，工厂可用板框机分离发酵液与菌丝体，将湿菌丝体加10～20倍水浸泡过夜，用90～100℃水浴回流提取2～5小时，过滤，将滤液浓缩后加2～5％倍的95％乙醇0～4℃沉淀8～10小时，干燥得姬松茸多糖肽。