[发明专利]姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法

权利要求书

1、一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)姬松茸的育种与特征

用组织分离法获得姬松茸纯菌株AB103，将其接种在PDA或麦芽汁固定斜面培养基上，于25～28℃恒温培养7～10天后，置于4℃左右的冰箱中保存备用，采用紫外诱变法对菌丝细胞进行诱变，紫外照射距离为20～30cm，照射时间为5～15秒，初筛诱变株在固体培养基上的菌丝体生长能力，复筛诱变株在液体培养基中菌丝体生长量和多糖肽产量，获得优质菌株AB103-51；

固体培养用40～50％的稻草或木屑、棉子壳，1％的蔗糖或葡萄糖，10～20％麸皮或米糠，1％的石膏或碳酸钙，加水拌匀，含水量60％，PH自然，瓶装，在1.5kg/m²的压力下灭菌1小时同，冷却后，在无菌操作下摇瓶种子接种于固体培养基内，培养温度22～26℃，20～30天菌丝体布满全瓶，原基萌发后，降低栽培温度22～25℃，保持适当温度、光照和通风，30～40天后，子实体成熟；(2)菌株的发酵工艺流程

本发明采用通气发酵法生产姬松茸菌丝体，发酵培养基成本低廉，发酵周期短，发酵工艺流程如下：

斜面菌种或茄瓶菌种→摇瓶种子→50-100L³种子罐，一级→500-1000L³种子罐，二级→5000-10吨发酵罐，

摇瓶种子的装量75～150ml/250ml或150～150ml/250ml培养基，往复式摇床振荡速度80～150次/分，或旋转式摇床振荡速度100～200转/分，培养温度100～200rpm，通气量1∶0.5～1∶1v/v min，发酵培养时间4～7天，随着发酵培养时间延长，培养基由混浊逐渐变清，发酵液中还原糖、氨态氮、PH都逐渐降低，菌丝体生物量不断增加，至第5～6天时多糖肽产量；(3)姬松茸多糖肽的提取

本发明所述姬松茸AB103-51的多糖肽提取工艺是：姬松茸发酵液用沙芯漏斗抽滤，分离发酵液和菌丝体，工厂可用板框机分离发酵液与菌丝体，将湿菌丝体加10～20倍水浸泡过夜，用90～100℃水浴回流提取2～5小时，过滤，将滤液浓缩后加2～5％倍的95％乙醇0～4℃沉淀8～10小时，干燥得姬松茸多糖肽。

2、根据权利要求1所述的一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于其中所述的优质菌株AB 103-51的分类命名为巴西蘑菇Agaricus blazei，保藏编号为CGMCC No.07722001325B。

3、根据权利要求1所述的一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于其中所述的优质菌株AB103-51的发酵工艺，其种子培养基的特征是100ml的培养基玉米粉1～3g、淀粉1～2g、硫酸镁0.05～0.1g、磷酸二氢钾0.1～0.2g。

4、根据权利要求1所述的一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于其中所述的优质菌株AB103-51的发酵工艺，其发酵培养基的特征是100ml的培养基的配比是淀粉1～3g、麸皮0.1～0.6g、葡萄糖或蔗糖0.5～1g、酵母粉0.1～0.5g、硫酸镁0.05～0.2g、磷酸二氢钾0.1～0.3g。

5、根据权利要求1所述的一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于其中所述的发酵工艺的特征是发酵罐培养可添加泡敌或豆油适量。

6、根据权利要求1所述的一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于其中所述的发酵工艺的特征是培养基中可添加玉米浆，添加量为0.1～1％。

7、根据权利要求1所述的一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于其中所述的发酵工艺的特征是摇瓶种的发酵条件250ml摇瓶装量75～150ml培养基，500ml摇瓶装量150～250ml培养基，采用往复式摇床，振荡速度80～150次/分，或旋转式摇床，振荡速度度100～200转/分，培养温度24～28℃，培养时间2～3天。

8、根据权利要求1所述的一种姬松茸的发酵工艺及其多糖肽的生产方法，其特征在于其中所述的发酵工艺的特征是发酵条件：接种量8～10％，搅拌速度100～200rpm，通气量1∶0.5～1∶1v/v min，发酵温度为24～28℃，罐压0.3～0.5kg/cm²，发酵培养时间2～3天。