[发明专利]利用味精发酵废液中的菌体来生产核糖核酸的方法无效
| 申请号： | 02112088.9 | 申请日： | 2002-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN1159449C | 公开（公告）日： | 2004-07-28 |
| 发明（设计）人： | 姚连生 | 申请（专利权）人： | 姚连生 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人： | 董英 |
| 地址： | 200030上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种利用味精发酵废液中的菌体来生产核糖核酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：用絮凝汽浮法从生产味精的发酵废液分离出菌体，收集，同时用水冲洗，沥干后，称重投料；将菌体悬浮于水中，用离子膜碱调pH至6-7；在搅拌下加入固体氯化铵，加热至沸，使温度保持在90-95℃，搅拌2-3小时；趁热进行板框压滤，滤液加0.5-1.0％活性炭处理，搅拌0.5小时，再进行板框过滤，滤液冷却至10-20℃，用6mol/l盐酸调pH至2-2.5，得核糖核酸(RNA)沉淀。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 味精 发酵 废液 中的 菌体 生产 核糖核酸 方法 | ||
【主权项】：
1、一种利用味精发酵废液中的菌体来生产核糖核酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：a.菌体分离：用絮凝汽浮法从生产味精的发酵废液分离出菌体，收集，同时用水冲洗，沥干后，称重投料；b.菌体预处理：将菌体悬浮于水中，用离子膜碱调pH至6-7；c.抽提：在搅拌下加入固体氯化铵，加热至沸，使温度保持在90-95℃，搅拌2-3小时；d.板框压滤：趁热进行板框压滤，滤液加0.5-1.0％活性炭处理，搅拌0.5小时，再进行板框过滤，滤液冷却至10-20℃，用6mol/l盐酸调pH至2-2.5，得核糖核酸沉淀。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于姚连生，未经姚连生许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/02112088.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：制备HMG－CoA还原酶抑制剂的方法
- 下一篇：低氧亲和力的突变型血红蛋白
- 同类专利
- dsRNA的制备方法及其在制备dsRNA标准品中的应用-202310099407.3
- 耿玉杰 - 武汉瀚海新酶生物科技有限公司
- 2023-02-01 - 2023-10-24 - C12P19/34
- 本发明提供了一种dsRNA的制备方法及其在制备dsRNA标准品中的应用，涉及生物技术领域。该dsRNA的制备方法包括先经体外转录合成ssRNA，再将反应产物中的体外转录模板降解为单个核苷酸；然后退火形成dsRNA，再使用S1核酸酶降解退火产物中的单链核酸，纯化反应产物得到dsRNA。该制备方法缓解了现有技术中缺少一种制备高纯度dsRNA方法的问题。
- 一种利用DNA聚合酶和DNA连接酶便捷制备含非天然碱基核酸链的方法及其应用-202210346898.2
- 陈庭坚;白静思;邹金容;曹懿君;吴静;郑鑫倩 - 华南理工大学
- 2022-04-02 - 2023-10-24 - C12P19/34
- 本发明公开一种利用DNA聚合酶和DNA连接酶便捷制备含非天然碱基核酸链的方法及其应用。该方法为将模板链、上游结合链和下游结合链与聚合酶反应缓冲液充分混合得到混合液Ⅰ、变性后，退火；加入非天然核苷三磷酸和DNA聚合酶，得到混合液Ⅱ，孵育，孵育结束后热处理变性聚合酶；将反应液纯化，得到中间混合产物A；将中间混合产物A与ATP、DNA连接酶混合在反应体系中，得到混合液Ⅲ，孵育后纯化，得到中间混合产物B；将中间混合产物B和亲和纯化磁珠混合在缓冲液中；将混合液用缓冲液多次洗涤，并用碱处理分离模板链，得到混合液Ⅳ；洗涤混合液Ⅳ后，加甲酰胺热孵育磁珠，得到混合液Ⅴ；纯化，得到含有非天然碱基的ssDNA。
- 一种基于KRAS蛋白的核苷酸交换方法-202110895927.6
- 范仕龙;陈喜玲 - 清华大学
- 2021-08-05 - 2023-10-24 - C12P19/34
- 本发明提供了一种基于KRAS蛋白的核苷酸交换方法。本发明中的核苷酸交换方法是在碱性磷酸酶的作用下，严格控制反应时间，按照一定的比例加入GTP类似物，将KRAS蛋白中的核苷酸GDP替换为GTP类似物。最终得到KRAS蛋白与GTP类似物复合物。本发明使用的核苷酸交换方法，可以方便快速的得到交换后的复合物样品。
- 用于抑制外周髓鞘蛋白-22的表达的产物和方法-202180092622.X
- S·Q·哈尔佩尔;K·克莱奥帕;M·斯塔夫鲁 - 全国儿童医院研究所;塞浦路斯肌肉萎缩症研究基金会暨神经病学与遗传学研究所
- 2021-11-30 - 2023-10-20 - C12P19/34
- 提供了用于抑制外周髓鞘蛋白‑22基因的表达的基于RNA干扰的方法和产物。提供了抑制所述外周髓鞘蛋白‑22基因的RNA以及编码所述RNA的DMA。如重组腺相关病毒等递送媒剂递送编码抑制所述外周髓鞘蛋白‑22基因的RNA的DMA。所述方法治疗夏科‑马里‑图思病(Charcot‑Marie‑Tooth Disease)，如夏科‑马里‑图思病1A型(CMT1A)。
- 使用蛋白酶控制限制酶活性-202111286567.6
- 朱振宇;孙大鹏;A·昆比 - 武汉爱博泰克生物科技有限公司
- 2021-11-02 - 2023-10-17 - C12P19/34
- 蛋白酶是水解蛋白质酶、消除其活性的酶。本发明利用包括蛋白酶K、内切蛋白酶LysC和/或胰蛋白酶的蛋白酶的水解活性来控制限制酶的活性和/或消除或减少不需要的DNA或RNA片段的产生(称为星号活性)。
- 用于选择性扩增等位基因的合成多核苷酸和方法-202280012877.5
- 查尔斯·罗迪 - 瑞红德西公司
- 2022-02-02 - 2023-10-13 - C12P19/34
- 在替代实施方案中，提供了基于引物的核酸扩增方法，其能够选择不扩增或修复特定等位基因，同时不干扰靶序列内特定核苷酸位置处的任何替代等位基因或突变的扩增或修复，或者换句话说，提供了用于选择性抑制一个等位基因同时扩增任何替代等位基因的方法，或者提供用于抑制野生型序列同时扩增点突变(包括扩增单核苷酸变体(SNV)、插入和缺失)的方法。在替代实施方案中，核酸组合物的一部分不选择性抑制特定核酸靶序列的扩增，从而提供可用于确定扩增的成功和确定特定核酸靶序列与编码替代等位基因或突变的序列的相对比率的内部对照。
- 高纯度RNA组合物及其制备方法-202310687777.9
- 史蒂芬·霍格;威廉·伊萨;爱德华·J·米拉科;珍妮弗·尼尔森;埃米·E·拉比多;加博尔·布托拉 - 摩登纳特斯有限公司
- 2017-09-14 - 2023-10-03 - C12P19/34
- 本申请涉及高纯度RNA组合物及其制备方法。本发明涉及用于治疗应用的改进的RNA组合物。所述RNA组合物特别适用于人治疗应用(例如，RNA治疗剂)。所述RNA组合物通过改进的方法，具体地讲，改进的体外转录(IVT)方法制备。本发明还涉及用于产生和纯化RNA(例如，治疗性RNA)的方法，以及使用所述RNA组合物的方法及其治疗应用。
- 一种无细胞体系全酶法微环DNA的制备方法及其应用-202310729480.4
- 柳伟强;付煜烨;许映冲;黄国帅;徐杰;齐金才;何腾飞;申姝茵;杨平 - 苏州泓迅生物科技股份有限公司
- 2023-06-20 - 2023-10-03 - C12P19/34
- 本发明提供了一种无细胞体系全酶法微环DNA的制备方法及其应用，通过构建含有基因治疗表达框架的重组质粒，经过聚合酶体外扩增，在整合酶的作用下分离成微环DNA和骨架载体，然后利用限制性内切酶将骨架载体切除线性DNA，再用核酸外切酶进一步降解掉线性DNA，达到彻底去除骨架载体的目的，从而获得高纯度的微环DNA。本发明采用无细胞体系的全酶法DNA复制体系制备高纯度微环DNA，较细胞内制备方法具有重复性好、纯度高、成本低的优势。
- 利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶无模板合成含非天然碱基寡核苷酸链的方法及其应用-202111302525.7
- 陈庭坚;王光远;何传平;刘家韵 - 华南理工大学
- 2021-11-04 - 2023-09-29 - C12P19/34
- 本发明涉及利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶无模板合成含非天然碱基寡核苷酸链的方法及其应用。将引发链单链DNA、TdT反应缓冲液和醋酸镁溶液混合，为混合液1；混合液1中加入天然的脱氧核糖核苷酸、dTPT3TP、dTPT3TP衍生物或者dNaMTP中的一种，为混合液2；混合溶液2中加入TdT，为混合液3；混合液3孵育，热处理，使TdT失活，为混合液4；混合液4中加入上样缓冲液，加热处理，使寡核苷酸链完全变性，通过变性胶，分析TdT将非天然碱基添加到寡核苷酸链3’末端的效果。该方法偶联效率高，成本低，操作方便，副产物少，不产生污染性废物。所述寡核苷酸链在DNA末端标记、六碱基信息存储中具有潜在应用价值。
- 用于合成5’-加帽RNA的组合物和方法-202310734863.0
- R·I·霍格雷夫;A·列别捷夫;A·P·麦卡弗里;D·施恩 - 垂林克生物技术有限公司
- 2016-09-20 - 2023-09-15 - C12P19/34
- 本文的发明名称为用于合成5’‑加帽RNA的组合物和方法。本文提供用于合成5’加帽RNA的方法和组合物，其中起始加帽寡核苷酸引物具有通式形式
- 一种基于单次加样的连接环化单链核酸的方法-202310559836.4
- 蔡梦 - 杭州纳博智造科技有限公司
- 2023-05-16 - 2023-09-05 - C12P19/34
- 本发明提供了一种基于单次加样的连接环化单链核酸的方法，包括：将待连接环化的单链核酸和其他组分一次性混合，以形成环化体系；和将所述环化体系置于连接环化条件，以使所述待连接环化的单链核酸连接环化，其中所述核酸为DNA和/或RNA，所述其他组分包括热稳定性DNA连接酶和/或RNA连接酶和可选地反应缓冲液。该方法一次性添加所有组分形成单链核酸的环化体系，能够提高单链核酸的环化连接效率，并应用于自动化环化单链核酸。
- 转座酶和Y衔接子用于片段化和标签化DNA的用途-201780032464.2
- R·A·哈;N·M·萨姆帕斯;B·J·彼得 - 安捷伦科技有限公司
- 2017-01-19 - 2023-09-05 - C12P19/34
- 本发明提供转座酶和Y衔接子用于片段化和标签化DNA的用途。本文中特别描述了包含一群第一寡核苷酸、第二寡核苷酸和第三寡核苷酸的衔接子，其中第一寡核苷酸、第二寡核苷酸和第三寡核苷酸杂交在一起以产生复合物，所述复合物包含：(i)包含转座酶识别序列的第一端，(ii)可变序列的中心单链区和(iii)包含非互补序列的第二端。还提供了一种方法、以及用于实施该方法的试剂盒。
- 从环境样品中检测李斯特菌的方法-202180078533.X
- P·K·比斯瓦斯;L·张;L·L·沃克;R·S·多诺弗里奥 - 纽勤有限公司
- 2021-10-21 - 2023-08-29 - C12P19/34
- 本文描述了从环境样品中检测李斯特菌。特别地，所述检测可以在当天或同一工作班次，例如在约12小时或更短或约6至10小时内可得到结果的情况下完成。所述当天检测利用短的孵育时间和/或浓缩步骤，结合快速检测测定来产生当天的结果。
- 用于加A法miRNA合成第一链cDNA的方法及产品-202210154192.6
- 宋东亮;滕人达;孙晓亮;竹个个 - 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 2022-02-21 - 2023-08-29 - C12P19/34
- 本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种用于加A法miRNA合成第一链cDNA的方法及产品。具体技术方案为：一种用于加A法miRNA合成第一链cDNA的逆转录引物，所述引物的序列从5’端到3’端依次为：5～15个碱基的通用引物序列、10～20个Oligo(dT)、1～3个与miRNA 3’配对的锚定碱基。并配合提供了含有该逆转录引物的反应体系，体系包括特定的逆转录酶混合试剂和缓冲试剂。利用本发明提供的本发明体系，可适用于多种miRNA模板，且检测灵敏度高、加A及逆转录效率高。
- 一种非天然核酸水凝胶及其制备方法与应用-202110101329.7
- 陈庭坚;张汝洁;彭乐丽;叶方开;雷谨铭;何传平;王光远 - 华南理工大学
- 2021-01-26 - 2023-08-18 - C12P19/34
- 本发明公开了一种非天然核酸水凝胶及其制备方法与应用，属于生物材料技术领域。本发明方法操作如下：在聚合酶链式反应体系中掺入可配对的、碱基部分的5号位含炔丙胺基修饰的人工核苷酸，制备得到部分碱基上含氨基连接臂的核酸片段，先与点击化学接头反应，再分别与5'端含相应基团的引物进行点击化学反应，得到“毛刷”引物，最后以含有目的片段的核酸片段或质粒为模板，通过“毛刷”引物进行PCR扩增，扩增产物浓缩后高温退火，即可。本发明提供的方法简易、普适性高，所得水凝胶可以保护功能DNA使其不易在血清中降解，不仅克服了传统DNA水凝胶的缺点，而且具有较高稳定性、交联程度可控以及携带遗传信息等优点，具有良好的应用前景。
- 一种全酶法从头合成DNA的方法-202310308718.6
- 肖晓文;赵春德;王早霞 - 北京擎科生物科技股份有限公司
- 2023-03-27 - 2023-08-11 - C12P19/34
- 本申请属于分子生物学领域，具体提供一种全酶法从头合成DNA的方法，本申请所提供的全酶法从头合成DNA的方法在合成步骤中只需使用3种常见类型的分子生物学酶、多聚体DNA单元、固相载体即可完成合成，仅依靠生物酶催化反应，而不需要任何非酶参与的化学反应的步骤，不需要特殊的场地，原料易制备，从而解决现有技术中成本高，操作复杂的技术问题，具有成本低，合成效率高的特点。
- 一种单链DNA制备方法-202310497111.7
- 王少辉;李贵喜;李三华;郭曙光;霍清园;李丹洋;齐华 - 河南赛诺特生物技术有限公司
- 2023-05-05 - 2023-08-01 - C12P19/34
- 本发明涉及一种单链DNA制备方法，包括如下步骤：(1)准备具有粘性末端的双链DNA序列和茎环引物，所述茎环引物包括成环部分和非成环部分，所述非成环部分含有与所述粘性末端互补的互补序列，利用所述互补序列与双链DNA序列的所述粘性末端互补连接；(2)使用具有双链外切酶活性的DNA外切酶对步骤(1)获得的长茎环引物从5’端或3’端进行酶切，直至切割至茎环位置停止，获得单链DNA。本发明的单链DNA制备方法操作简便，无需复杂的操作流程，成本较低，使用试剂都是市场上较易购买的，不受序列长度限制，可制备小至几十个碱基、大至5‑10kb的单链产物。
- 一种测定mRNA 3’Poly(A)尾长度及其分布的方法-202310678312.7
- 吕能铭;张武;莫子瑶 - 启辰生生物科技（珠海）有限公司
- 2023-06-09 - 2023-08-01 - C12P19/34
- 本发明公开一种测定mRNA 3’Poly(A)尾长度及其分布的方法。该方法包括以下步骤：(1)mRNA变性；(2)使变性后的mRNA与内切核糖核酸酶在适于酶切的条件下孵育；(3)确定mRNA 3’Poly(A)尾长度及其分布。本发明解决了通过RNase T1切割后较为繁琐的实验步骤。此外，通过mRNA样品前处理中改变消化酶及简化实验流程等方面进行了优化，从而进一步提高了检测方法的可靠性，同时核糖核酸内切酶切割位点的目标物响应度明显提高，且实验周期明显缩短。
- 一种长单链DNA的制备方法-201910989379.6
- 顾宏周;张俏;夏凯 - 复旦大学附属肿瘤医院
- 2019-10-17 - 2023-08-01 - C12P19/34
- 本发明公开了一种借助I类和II类水解性脱氧核酶高效制备长单链DNA的方法。该方法主要包括设计并构建重组噬菌粒，获得噬菌粒环状单链DNA步骤，同时采用I类脱氧核酶和II类脱氧核酶突变体切割环状单链DNA，纯化回收酶切得到的所述长单链DNA。利用这两类能快速水解DNA的脱氧核酶，可代替限制性内切酶，低成本的实现对辅助噬菌体法制备出的DNA序列的特异性切割，大量、经济、高纯度制备任意长度和序列的单链DNA。
- 一种mRNA的poly(A)尾长度的分析方法-202310138112.2
- 潘有东;刘浩;朱蕾;劳楚;宁海升;万季;赵钊;王弈 - 深圳新合睿恩生物医疗科技有限公司;深圳市新合生物医疗科技有限公司;广州市新合生物医疗科技有限公司
- 2023-02-20 - 2023-07-18 - C12P19/34
- 本发明涉及一种mRNA的poly(A)切割方法，所述切割方法包括以下步骤：在mRNA切割反应液中，加入切割酶，所述切割酶为RNase A酶，每1ng RNase所切割所述mRNA的量为0.04‑1.5pmol，置于室温静置反应5min‑30min，获得poly(A)尾。本发明还公开了mRNA的poly(A)切割方法在poly(A)长度分析中的应用。本发明所述方法具有以下优点：大大减少了酶使用量，RNase A的使用成本约为RNase T1的千分之一；大大缩短了反应时间，RNase A在15min内即可完成mRNA的切割，是RNase T1的十分之一；反应条件更为简单易实现，RNase A酶反应只需于室温静置。
- 核酸扩增方法-201810154405.9
- 能登谷伦崇;山下秀治;吉村美香;前田丰 - 希森美康株式会社
- 2018-02-23 - 2023-07-14 - C12P19/34
- 本发明旨在提供可更简便地抑制遗留导致的假阳性的核酸扩增方法。本发明由核酸扩增方法解决上述的课题，其特征在于，包括以试样中所含的目标核酸作为模板而进行第一核酸扩增工序，以在上述第一核酸扩增工序中生成的扩增产物作为模板而进行第二核酸扩增工序，在第一核酸扩增工序中，使用选择性地扩增不含尿嘧啶碱基的核酸的DNA聚合酶，生成不含尿嘧啶碱基的扩增产物，在第二核酸扩增工序中，使用含尿嘧啶碱基的引物及/或dUTP和能扩增含尿嘧啶碱基的核酸的DNA聚合酶，生成含尿嘧啶碱基的扩增产物。
- DNA组装混合物和其使用方法-202180074286.6
- V·L·道;吴杰凯;傅觉鲁 - 新加坡国立大学
- 2021-10-01 - 2023-07-04 - C12P19/34
- 本文公开了一种DNA组装混合物，其包含作为XthA的3’‑5’外切核酸酶；和缓冲液。还公开了一种DNA组装混合物，其包含：包含3’‑5’外切核酸酶的不含聚合酶和连接酶的组合物；和缓冲液。还公开了一种组装多个DNA片段的方法，其包括：(a)将所述多个DNA片段与如本文所公开的DNA组装混合物混合；和(b)将来自步骤(a)的所述混合物在一定温度下孵育适于组装所述多个DNA片段的时间段。进一步公开了如本文所公开的DNA组装混合物在高通量DNA组装中的用途，其中将所述DNA组装混合物用于微流体平台中以组装DNA。
- 一种无模板DNA酶促合成方法-202211622358.9
- 贺建奎;李周芳;徐国伟 - 贺建奎
- 2022-12-16 - 2023-06-30 - C12P19/34
- 本发明涉及一种无模板DNA酶促合成方法，包括将TdT酶和引发链分别固定在反应面板上的反应孔底部，调节第一反应缓冲液的pH值，使所述TdT酶完全没有催化活性，所述TdT酶的结合结构域不受影响；加入单一、设定量、预设的脱氧核苷酸，所述脱氧核苷酸与第二反应缓冲液混合加入，让脱氧核苷酸扩散到反应孔中，并且让TdT酶反应位置上只结合一个dNTP，此时TdT酶是非活性状态且不进行催化连接反应，dNTP只是占据了TdT酶的结合结构域以防止多余的dNTP连接到该位置；用第三反应缓冲液冲洗掉所有没有结合上去的dNTP，然后更换第四反应缓冲液，使TdT酶激活，从而催化dNTP连接反应开启，一个核苷酸就被成功加到了DNA反应链的末端，继续下一个循环。本发明可以延伸DNA链超过300nt。
- 促进MTR1核酶催化反应的方法及MTR1核酶的应用-202210238704.7
- 黄林;邓洁 - 中山大学孙逸仙纪念医院
- 2022-03-11 - 2023-06-23 - C12P19/34
- 本发明涉及酶工程技术领域，公开了一种促进MTR1核酶催化反应的方法及MTR1核酶的应用，其中促进的方法包括：通过促进底物RNA、辅助因子O
- 涉及核酸合成的组合物和方法-201680008727.1
- M·C·陈;R·A·拉扎尔;J·黄;G·R·麦金罗伊 - 核酸有限公司
- 2016-02-10 - 2023-06-16 - C12P19/34
- 本发明涉及特异性末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在核酸合成方法中的应用，合成核酸的方法，以及包含所述酶的试剂盒在核酸合成方法中的应用。本发明还涉及末端脱氧核苷酸转移酶和3’‑封闭的核苷酸三磷酸在非模板依赖性核酸合成方法中的应用。
- 大豆提取物Bowman-Birk inhibitor切割DNA的方法-202011401295.5
- 杨兆琪;龚森怡;尚孟迪;金坚 - 江南大学
- 2020-12-02 - 2023-06-13 - C12P19/34
- 本发明公开了大豆提取物Bowman‑Birk inhibitor切割DNA的方法，属于医药技术领域。本发明提供了大豆Bowman‑Birk胰蛋白酶抑制剂BBI‑A的一种新应用，将BBI‑A应用于DNA的切割中，通过条件的优化，使得切割效率可达100％，可有效切割DNA。为制备DNA结构探针、并且为潜在制备抗肿瘤药物提供了新的可能。
- 使用热稳定性酶从头开始的不依赖于模板的核酸合成-202180055846.3
- I·兰德里安贾托沃-巴鲁;A·塞德;R·拉希尔 - 辛希克斯
- 2021-06-11 - 2023-06-09 - C12P19/34
- 本发明涉及核酸合成或测序领域，更具体地说，涉及从头开始的核酸合成方法，该方法包括在存在古细菌DNA引物酶或其功能活性片段和/或变体的情况下，使具有游离3’‑羟基的核苷酸与至少一种核苷三磷酸或核苷三磷酸的组合接触，从而使所述核苷三磷酸共价结合到所述核苷酸的游离3’‑羟基。本发明还涉及古细菌DNA引物酶的分离的功能活性片段，这些功能活性片段具有能够从头开始的单链核酸合成活性和不依赖于模板的末端核苷酸转移酶活性二者。
- 使用热稳定酶的受控且不依赖于模板的核酸合成-202180056165.9
- I·兰德里安贾托沃-巴鲁;A·塞德;R·拉希尔 - 辛希克斯
- 2021-06-11 - 2023-06-09 - C12P19/34
- 本发明涉及不依赖于模板的核酸合成方法，所述方法包括在存在古细菌DNA引物酶或其功能活性片段和/或变体的情况下，使包含具有游离3’‑羟基的3’‑末端核苷酸的起始序列与至少一种核苷三磷酸或核苷三磷酸的组合反复接触，从而使所述核苷三磷酸共价结合至所述3’‑末端核苷酸的游离3’‑羟基。本发明还涉及古细菌DNA引物酶的分离的功能活性片段，这些片段能够具有不依赖于模板的末端核苷酸转移酶活性，但不具备不依赖于模板的引物酶活性。
- 产生经扩增的双链脱氧核糖核酸的方法以及用于所述方法的组合物和试剂盒-201780061724.9
- 当利和夫;马格诺利娅·博斯蒂克;安德鲁·法默 - 宝生物工程（美国）有限公司
- 2017-11-08 - 2023-05-23 - C12P19/34
- 提供从核酸样品产生经扩增的双链脱氧核糖核酸(dsDNA)的方法。所述方法的各个方面包括使用单一产物核酸引物和模板转换寡核苷酸进行扩增以产生经扩增的dsDNA产物。也提供用于执行所述方法的组合物和试剂盒。
- 用于基因片段连接的应用方法和试剂盒-202111359063.2
- 李敏 - 北京光华生明生物科技有限公司
- 2021-11-16 - 2023-05-19 - C12P19/34
- 本发明属于生物酶应用技术领域，具体涉及用于基因片段连接的蛋白酶的核酸序列。本发明还涉及用于基因片段连接的方法，所述方法包括用于基因片段连接的蛋白酶的核酸序列。本发明还涉及用于基因片段连接的试剂盒，所述试剂盒包括用于基因片段连接的蛋白酶的核酸序列。本发明还涉及针对用于基因片段连接的蛋白酶在对具有不同序列特征，不同片段大小以及不同片段数量的基因片段进行连接的过程中的应用。使用本发明的用于基因片段连接的方法和试剂盒，能够特异、高效、快速，较准确地进行microRNA基因片段，高GC含量的基因片段以及多个长基因片段的连接及基因克隆。
- 专利分类
