FYJNa过表达载体pcDNA3.1‑FYJNa在显著增强A549/DDP细胞ABCC1基因表达中的应用,属于基因工程技术领域,其特征在于,FYJNa过表达载体pcDNA3.1‑FYJNa在显著增强A549/DDP细胞ABCC1基因表达中的应用的FYJNa基因核苷酸序列如Seq ID No:1所示。利用对A549/DDP细胞进行总RNA提取后反转录为cDNA,找到CREB1基因的CDS区及对应的mRNA序列,设计引物,加上HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,扩增CREB1基因CDS区;然后进行中性突变,酶切载体,连接目的片段与载体,重组表达载体,亚克隆完成后进行点突变,分别检测FYJNa和ABCC1基因mRNA和蛋白的表达水平,结果显示过表达FYJNa可上调ABCC1的mRNA和蛋白水平的表达。
大豆低温诱导型启动子、包含该启动子的重组表达载体及应用,本发明涉及植物基因工程领域,具体涉及大豆基因启动子序列在低温胁迫下可以作为启动子调控基因的表达。本发明的目的是为了解决有效的大豆低温诱导型启动子未被研制出来的问题。本发明的启动子来源于大豆乙烯响应因子基因GmERF9的启动子序列,命名为GmERF9P,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示。所述的序列中含有多种与胁迫相关的顺式作用元件。所述顺式作用元件分别为GT‑1、BIHD10S、WRKY、MYB、MYC和G‑box。本发明的大豆低温诱导型启动子用于在低温下诱导抗寒基因表达。
一种通过RNAi沉默CREB1基因降低肺癌细胞多药耐药性的载体pFYJN‑1,属于基因工程技术领域,其特征在于:设计最优靶向CREB1的干扰片段,其核苷酸序列如Seq ID No:1所示,构建靶向CREB1的shRNA干扰表达载体,命名为pFYJN‑1,转染肺癌细胞,通过qRT‑PCR、Western blot和Odyssey双红外激光成像系统检测RNAi后的CREB1和MRP1基因mRNA、蛋白的表达水平和蛋白条带变化并分析结果;流式细胞术检测细胞Rho123外排,结果显示:敲低CREB1的表达能下调MRP1基因的表达,且肺癌细胞Rho123外排减弱,药物潴留量增加,逆转肺癌细胞MDR。