本发明公开了一种检测禽流感三价DNA疫苗中单个质粒含量的引物和探针组合及试剂盒，包括SEQ ID No.1~SEQ ID No.6所示核苷酸序列的引物及SEQ ID No.7~SEQ ID No.9所示核苷酸序列的TaqMan探针。本发明建立的定量测定和区分禽流感（H5+H7）三价DNA疫苗（pH5‑FJ（H5‑Re13）株+pH5‑SX（H5‑Re14）株+pH7‑YN（H7‑Re4）株）中pH5‑FJ（H5‑Re13）株、pH5‑SX（H5‑Re14）株和pH7‑YN（H7‑Re4）株各组份含量的TaqMan荧光定量PCR方法重复性好，准确性高，对于检测禽流感DNA三价苗中各个质粒的含量监控具有重要的现实意义。
