本发明公开了一种用于单核细胞增生李斯特菌检测的引物组、试剂、试剂盒及检测方法。本发明所述的引物组包括CRISPR/Cas12a引物组及crDNA引物组，其碱基序列分别如SEQ ID No.1、2、3和4所示。该检测方法使用RPA扩增技术进行靶标DNA扩增，再与CRISPR/Cas12a体系偶联，等温条件下扩增，用荧光检测仪检测扩增结果的荧光曲线，以判断待测样品里是否存在单核细胞增生李斯特菌。本发明的检测方法快捷迅速、特异性强、灵敏度高、不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明公开了一种用于空肠弯曲杆菌检测的CRISPR/Cas12a引物、试剂盒及其使用方法，所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列，所述试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crRNA或crRNA制备试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶。本发明的试剂盒及其使用方法对于志贺氏菌的检测具有快速、特异性强和灵敏度高等优点，其检测过程不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明公开了基于CRISPR/Cas12a方法检测志贺氏菌的试剂盒及其使用方法，本发明所述的试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crRNA或crRNA制备试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶；所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID NO.1所示序列的CRISPR/Cas12a上游引物，如SEQ ID NO.2所示序列的CRISPR/Cas12a下游引物。本发明的试剂盒及其使用方法对于志贺氏菌的检测具有快速、特异性强和灵敏度高等优点，其检测过程不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明公开了一种用于克罗诺杆菌检测的试剂盒及检测方法，所述试剂盒CRISPR/Cas12a引物、crDNA序列、crRNA转录试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶；其中，所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的序列，所述crDNA序列包括如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的序列。本发明的试剂盒及其检测方法对于克罗诺杆菌的检测具有快速、特异性强和灵敏度高等优点、不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明公开了一种检测大肠杆菌O157的试剂盒及检测方法，本发明所述的试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crRNA或crRNA制备试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶，所述crRNA制备试剂包括crDNA序列和crRNA转录试剂，所述的CRISPR/Cas12a引物及crDNA碱基序列见SEQ ID No.1、2、3和4。该检测试剂盒及检测方法快捷迅速、特异性强、灵敏度高、不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明公开了一种用于金黄色葡萄球菌活菌检测的试剂、试剂盒及应用。所述检测试剂包括：引物对，包括序列分别如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的引物；以及探针，其序列如SEQ ID NO：1所示。所述探针的3’端标记有荧光淬灭基团，5’端标记有荧光报告基团。本发明使用了可特异性识别致病菌基因序列的扩增探针和引物对，因而具有特异性高、稳定性好的特点，本发明提供的检测方法还具有简单、快速、灵敏的优点。
本发明公开了一种用于大肠杆菌O157:H7血清型致病菌检测的试剂、试剂盒及应用。所述检测试剂包括：主要由第一引物和第二引物组成的引物对，所述第一引物和第二引物的序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2所示。本发明通过G‑四链体核酸拟酶催化底物氧化还原反应产生的颜色变化，能够以肉眼直接同时判断待测样品中是否含有大肠杆菌O157:H7，提高了检测食源性致病菌的灵敏度，使用G‑四链体核酸拟酶通过引入酶循环信号放大及PCR产物放大双重策略实现最终信号的放大，从而实现对大肠杆菌O157:H7的可视化检测。
本发明提供了一种检测产志贺毒素大肠埃希氏菌的实时荧光RAA的引物、探针、试剂盒和检测方法，stx1基因的引物序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，stx1基因探针的序列为如SEQ ID NO.3所示；stx2基因的引物序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示，stx2基因探针的序列为如SEQ ID NO.6所示；试剂盒包括引物、探针、缓冲液和纯化水；本发明的实时荧光RAA检测方法特异性达100％，灵敏度达1.6×103cfu/mL，15min内可得到结果，比实时荧光PCR方法更快速，灵敏简便，可用于疾病监测、食品安全检测，适合基层实验室推广应用。
本发明提供了一种检测大肠埃希氏菌O157的实时荧光RAA的引物、探针、试剂盒和检测方法，引物的序列中上游引物如SEQ ID NO.1所示，下游引物如SEQ ID NO.2所示；探针的序列为如SEQ ID NO.3所示；试剂盒包括引物、探针、缓冲液和纯化水，RAA检测方法：提取样品DNA，以样品DNA为模板，利用试剂盒进行RAA扩增，并在扩增过程中进行实时荧光检测；本发明的实时荧光RAA检测方法的特异性达100％，灵敏度达8.0×101cfu/mL，15min内可得到结果，比实时荧光PCR方法更快速。该方法简便、快速、灵敏、便携、价格低廉，可用于疾病监测、食品安全检测，适合基层实验室推广应用。
