本发明公开了一种基于无标记三嵌段DNA的电化学适配体生物传感器检测目标DNA核酸的方法,属于核酸检测领域。该电化学适配体生物传感器包括含有腺嘌呤链的三嵌段DNA探针、DNA修饰的金电极以及信号探针;其中,DNA修饰的金电极为用所述含有腺嘌呤链的三嵌段DNA探针修饰的金电极,信号探针为六氨基合钌。三嵌段DNA探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明两个DNA探针被固定在金电极的表面,特别是可以捕获并与目标DNA杂交;作为信号指示剂,六氨基合钌可以被带负电荷的DNA磷酸盐骨架静电吸附。通过阴离子DNA主链上吸附的六氨基合钌数量的增加导致电化学信号的增加,进而可以准确定量目标DNA。