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[发明专利]一种负载可复制型DNA疫苗的杂交型外泌体及其制备方法-CN202310439714.1在审
发明人：叶邦策;左芳芳;尹斌成 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2023-04-23 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明公开了一种负载可复制型DNA疫苗的杂交型外泌体及其制备方法，属于生物医药领域。所述杂交型外泌体包括负载可复制型DNA疫苗的阳离子脂质体以及与其杂交的外泌体和所述外泌体表面修饰的免疫佐剂CpG，其中，所述负载可复制型DNA疫苗的阳离子脂质体由可复制型DNA疫苗和阳离子脂质体融合而成。本发明利用了外泌体与脂质体相似的脂质结构及互补的生理功能，构建了一种负载可复制型DNA疫苗的杂交型外泌体，该杂交型外泌体解决了外泌体难以负载大分子药物的问题，具有良好的生物相容性和无细胞毒性，能有效地被免疫细胞摄取并激活免疫细胞，有望应用于肿瘤免疫治疗和预防中。
一种负载复制 dna 疫苗杂交型外泌体及其制备方法

[发明专利]一种基于Cas9核酸等温扩增的免疫层析多重基因检测方法-CN202010200985.8有效
发明人：叶邦策;王露莹;尹斌成;沈幸盈 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2020-03-20 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： G01N33/558 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术及医学检验技术领域，尤其涉及一种基于Cas9核酸等温扩增的免疫层析多重基因检测方法，包括以下步骤：(1)从待检测样本中提取待检测基因组DNA；(2)以待检测基因组DNA为模板，进行多重等温扩增，得多重扩增核酸产物；(3)将多重扩增核酸产物滴加在免疫层析试纸上，所述免疫层析试纸设有若干条检测线和一条质控线，观察检测线和质控线的颜色，确定检测结果。本发明的检测方法可以同时检测多种核酸产物，操作简便、检测时间短、结果即时可读，能广泛应用于基层检测和家庭检测，不受仪器的局限。
一种基于 cas9 核酸等温扩增免疫层析多重基因检测方法

[发明专利]一种工程化外泌体及其制备方法和应用-CN202111466966.0在审
发明人：叶邦策;梁世福;尹斌成 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2021-12-02 - 公布日： 2022-03-04 - 主分类号： A61K9/50 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药技术领域，公开了一种工程化外泌体及其制备方法和应用。本发明的外泌体，由细胞THP‑1依次用(12‑)十四酸佛波酯(‑13‑)乙酸盐PMA、脂多糖LPS诱导，所得M1巨噬细胞用DSPE‑PEG2000‑Mal的RMPI 1640培养，取上清液离心、超滤浓缩、再纯化得纯化外泌体；再用外泌体负载治疗药物并用Angiopep‑2或/和CD133 aptamer修饰，得工程化外泌体。本发明所得的工程化外泌体能靶向输送小分子药物或核酸药物通过血脑屏障，显著抑制神经胶质瘤细胞和神经胶质瘤干细胞的生长，诱导神经胶质瘤和神经胶质瘤干细胞的细胞凋亡并延长荷瘤小鼠的生存期，并且没有明显的副作用。因此，该新型工程化外泌体可用于脑部肿瘤的有效治疗。
一种工程化外及其制备方法应用

[发明专利]一种基于Cas9切口酶偶联DNA聚合酶的恒温核酸检测分析方法及试剂盒-CN201910119855.9在审
发明人：叶邦策;尹斌成;王婷 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2019-02-18 - 公布日： 2019-12-24 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于Cas9切口酶偶联DNA聚合酶的恒温核酸检测分析方法，是在恒温条件下特异性检测靶标核酸；包括以下步骤：以两条分别与靶DNA序列互补的sgRNA序列，两组Cas9n‑sgRNA复合物分别与前间区序列邻近基序毗邻的匹配靶DNA序列结合后，通过Cas9n单口切割酶活性和恒温DNA聚合酶链置换活性，获得一条单链靶DNA序列，该序列在引物1和引物2，DNA聚合酶及Cas9n‑sgRNA复合物的共同作用下，在恒温条件下反复进行引物杂交，延伸，切割，链置换反应，扩增获得大量靶DNA序列，荧光染料与双链DNA产物结合产生荧光信号，实时测定反应体系中的荧光信号强度，与标准工作曲线对比，计算出靶标基因组或DNA序列的浓度。本发明尤其适用于核酸即时检测。
靶DNA序列恒温条件荧光信号复合物引物标准工作曲线靶标基因组链置换反应链置换活性特异性检测靶标核酸核酸检测即时检测实时测定引物杂交荧光染料双链DNA 切割酶切口酶核酸单链基序扩增两组偶联匹配切割邻近毗邻延伸分析

[发明专利]一种恒温扩增反应试剂-CN201610598257.0在审
发明人：叶邦策;尹斌成;史杨 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2016-07-27 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种针对长双链DNA的恒温扩增反应试剂，其使用的恒温扩增反应以水为溶剂，添加有Tris–HCl、MgCl2、KCl、DMSO、NTPs、dNTPs、DTT、Na4P2O7、Na2HPO4、NaH2PO4以及限制性内切酶、T4 DNA连接酶、AMV逆转录酶、T7 RNA聚合酶、RNase H酶，各适量。本发明的恒温扩增体系相对于现有的恒温扩增体系，主要针对长度大于500 bp的双链DNA，甚至于可适用于长度大于2000 bp的双链DNA，应用范围更广。
一种恒温扩增反应试剂

[发明专利]一种使用免疫磁珠分离血清中外泌体的方法-CN201610590417.7在审
发明人：叶邦策;倪自鹏;尹斌成 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2016-07-26 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： G01N1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种使用免疫磁珠分离血清中外泌体的方法，方法包括血清预处理，单克隆抗体偶联磁珠，抗体‑磁珠复合物分离血清中外泌体步骤。本发明的优点是：操作简单，成本低；且可对血清中含有特定标志物的外泌体进行分离。
一种使用免疫分离血清中外方法

[发明专利]一种RNA聚合酶和连接酶偶联反应介导的定量检测核酸的PCR分析方法-CN201410317015.0在审
发明人：叶邦策;尹斌成;于翠媛 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2014-07-04 - 公布日： 2014-09-10 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种RNA聚合酶和连接酶偶联反应介导的定量检测核酸的PCR分析方法，包括以下步骤：在靶标核酸存在下，连接酶介导寡核苷酸探针间3′端羟基和5′端磷酸基团反应形成磷酸二酯键，连接产物具有RNA聚合酶启动子序列，进而启动RNA聚合酶大量合成含有靶标核酸序列的RNA片段，该RNA片段能够充当靶标核酸继续介导寡核苷酸探针间的连接反应，RNA聚合酶的引入提高了连接反应效率，为后续的PCR反应提供了更多的扩增模板，实时测定反应体系中的荧光信号强度，与标准工作曲线对比，计算出靶标核酸的浓度。该方法具有灵敏度高、特异性强、设计简单、反应时间短等特点，可广泛应用于生物基础研究和临床诊断中的核酸检测。
一种 rna 聚合连接酶反应定量检测核酸 pcr 分析方法

[发明专利]定量检测microRNA的PCR分析方法-CN201310291939.3有效
发明人：叶邦策;尹斌成;于翠媛 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2013-07-12 - 公布日： 2013-09-25 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于碱基堆积杂交原理的定量检测microRNA的PCR分析方法，包括以下步骤：利用靶标microRNA与DNA扩增模板结合后，通过碱基堆积杂交作用稳定了正向引物与DNA扩增模板的结合，在DNA聚合酶作用下延伸正向引物，在与反向引物共同作用下，引发PCR反应，得到双链DNA，染料SYBR Green I与双链DNA结合产生荧光信号，实时测定反应体系中的荧光信号强度，与标准工作曲线对比，计算出靶标microRNA的浓度。该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简单、成本低等特点，可广泛应用于组织，血液或细胞的生物样本中microRNA检测。
定量检测 microrna pcr 分析方法

[发明专利]一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米银簇探针定量检测microRNA的分析方法-CN201210107456.9有效
发明人：叶邦策;尹斌成;刘玉强 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2012-04-13 - 公布日： 2012-10-10 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米银簇探针定量检测microRNA的分析方法。该方法是，设计一条含有三种功能序列的DNA扩增模板：与靶标microRNA结合序列，nicking核酸内切酶酶切序列和合成荧光纳米簇的DNA互补序列。当靶标microRNA与DNA扩增模板结合后，诱导恒温扩增反应和nicking核酸内切酶特异性的酶切反应，得到大量单链DNA产物，其中合成荧光纳米银簇的DNA序列与硝酸银溶液在硼氢化钠的还原作用下制备荧光纳米银簇探针，测定反应体系的荧光信号并计算荧光改变值，与标准工作曲线比对，推算出靶标microRNA的浓度。该方法具有灵敏度高、特异性强、线性检测范围宽、背景信号低、操作简单等特点，可广泛应用于组织，血液或细胞的生物样本中microRNA检测。
一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米探针定量检测 microrna 分析方法

[发明专利]纳米粒子强化的荧光偏振分析方法-CN200810041166.2有效
发明人：叶邦策;尹斌成 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2008-07-29 - 公布日： 2010-02-03 - 主分类号： G01N21/76 文献下载
摘要：本发明提供一种灵敏度更高、特异性更强和使用范围更广的荧光偏振分析方法，本方法中待测样品通过扩散作用进入分子识别元件，经分子识别，然后与分子识别元件发生特异性结合，其生物或化学反应产生的信号通过纳米粒子将荧光偏振信号放大，以此达到高灵敏度检测的目的。本发明所提供的纳米粒子强化的荧光偏振分析方法，与传统的荧光偏振方法比较，本方法具有灵敏度更高，结果准确可靠，检出限更低，适用范围更广，实时在线检测，干扰因素少和线性范围较宽的特点，是一种简便实用的分析技术。
纳米粒子强化荧光偏振分析方法

[发明专利]管式生物芯片-CN200610023184.9无效
发明人：叶邦策;尹斌成 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2006-01-10 - 公布日： 2006-07-19 - 主分类号： G01N33/48 文献下载
摘要：本发明涉及一种生物芯片，其包括介质和介质支架；所说的介质是固定有不同识别物质的多孔微珠和若干个定位微珠，所说的介质支架是若干根长度相同或不同的透明管，或设有凹槽的平板；其中，在每一根透明管或凹槽中置有若干个固定有不同识别物质的多孔微珠，固定有不同识别物质的多孔微珠间置有定位微珠。与现有的生物芯片相比，本发明具有检测速度快、灵敏度高、成本低及无污染等优点。
生物芯片

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