本发明涉及一种猪副流感病毒5型巢式PCR试剂盒,包括10×PCR反应缓冲液,Mg2+,dNTP,引物和Taq酶,其特征在于:所述的引物为:(1)检测pPIV‑5F基因的外套引物:pPIV‑5‑oF:TCGCCGATTAGTGGATGTAATATA A(SEQ ID No.1),pPIV‑5‑oR:ATATAGGTCAAATCTAATCCCACAATCT(SEQ ID No.2);(2)检测pPIV‑5F基因的内套引物:pPIV‑5‑iF:CCC AAG ATG CTA TCA TTG GCT CAA T(SEQ ID No.3),pPIV‑5‑iR:CTAATTTTTCAAGCACGGCTAC(SEQ ID No.4)。本发明通过巢式PCR方法对pPIV5基因进行检测,提高了检测的灵敏度和特异性,克服了现有的RT‑PCR的弊端,节省了实验经费并且检测结果更加准确。