本发明提供一种数字定量PCR(digital and quantitative PCR,dqPCR)的核酸样品测量方法,包括以下步骤。提供具有多个反应孔的测试载具,以对核酸样品进行数字定量PCR。特别是针对具有多个浓度范围差异较广的核酸标靶的待测核酸样品,可以同时以数字PCR及定量PCR测量,以定量核酸标靶的拷贝数。
本公开涉及一种使用来自女性的样本,例如子宫内膜检体来测定子宫内膜状态的方法,所述方法包括:(a)对来自女性的子宫内膜样本执行分析以测定子宫内膜样本的微小核糖核酸(miRNA)表达谱,其中miRNA表达谱包括多个miRNA,例如分别具有SEQ ID NO:1到SEQ ID NO:167的序列的167个miRNA的表达水平;和(b)使用例如计算机算法分析miRNA表达谱以获得容受性预测评分。本公开的另一方面涉及适合执行所述方法的试剂盒,以及使用试剂盒于诊断和治疗目的。
本发明提供一种具有SEQ ID NO:1的核苷酸序列、具有SEQ ID NO:2的通用反向引物、通用反转录引物、引物设计方法以及miRNA检测方法。在miRNA检测方法中,使用所述通用反转录引物对miRNA样品进行cDNA合成,而所述通用反向引物用于在qPCR定量检测时进行所述cDNA分子扩增。所述引物设计方法使用所述通用反向引物序列、所述核苷酸序列及设计规则,以设计qPCR定量检测所用的引物。本发明的通用反转录引物、通用反向引物以及由引物设计方法所设计出的引物具有较佳的特异性及敏感度,同时兼具降低成本及方便使用的特性,且不需对引物进行额外修饰。