本发明属于抗体制备领域，具体涉及一种TIGIT纳米抗体及其制备方法与应用。本发明的TIGIT纳米抗体，氨基酸序列为SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ IDNO.10、SEQ ID NO.11中的一种。制备过程如下：构建TIGIT抗原对羊驼进行免疫，获得羊驼PBMC细胞；对细胞进行RNA的捕获，反转录为cDNA，进行PCR获得抗体基因片段，通过哺乳动物细胞高通量表达系统进行高通量表达；最后通过ELISA与FACS检测筛选获得TIGIT的纳米抗体。本发明的制备方法简便，且哺乳动物细胞表达系统诱导抗体高效表达，翻译后可进行加工修饰，其活性更接近于天然抗体。
本发明公开了一种抗CD3的纳米抗体或其抗原结合部分及其制备方法，所述抗体包含SEQ ID NO.1所示的重链可变区中的互补决定区CDR1‑CDR3。本发明首先构建CD3抗原对羊驼进行四次免疫后，获得羊驼PBMC细胞；其次通过微流控技术对PBMC细胞进行筛选分离；对单个细胞进行RNA的捕获，通过巢氏PCR的方法获得抗体基因片段，构建真核表达载体；然后通过哺乳动物细胞高通量表达系统诱导抗体高通量表达；最后通过ELISA与FACS检测，及测序结果分析获得了具有高的灵敏度和特异性的抗体。该抗体可用于肿瘤和过度性增值疾病的治疗。
本发明属于抗体制备技术领域，具体涉及一种抗LAG3纳米抗体及其制备方法与应用。本发明提供的LAG3纳米抗体，氨基酸序列为SEQ ID NO.7、SEQ IDNO.8中的一种；制备过程如下：构建LAG3抗原对羊驼进行免疫后，获得羊驼PBMC细胞；对细胞进行RNA的捕获，反转录为cDNA，进行PCR获得抗体基因片段，构建到载体上；通过单克隆哺乳动物细胞高通量表达系统进行高通量表达；最后通过ELISA与FACS检测，并测序验证即得。本发明提供的制备方法操作简便，且哺乳动物细胞表达系统诱导抗体高效表达，翻译后可进行加工修饰，其活性更接近于天然抗体。
