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[发明专利]胞外酶催化合成鼠李糖脂的方法-CN202110466767.3有效
发明人：徐安明;张晓晓;董维亮;周杰;姜岷 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-04-28 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12P19/44 文献下载
摘要：本发明公开了胞外酶催化合成鼠李糖脂的方法，利用鼠李糖基转移酶RhlB在胞外催化鼠李糖脂前体dTDP‑L‑鼠李糖和HAAs合成鼠李糖脂。其中dTDP‑L‑鼠李糖和HAAs基于基因改造菌株生产，其中一株菌可合成dTDP‑L‑rhamnose但不能合成HAAs，另外一株菌只能合成HAAs不能合成dTDP‑L‑rhamnose。将这两株菌合成的鼠李糖脂前体进行混合后，可在胞外利用鼠李糖脂合成酶RhlB在胞外催化前体dTDP‑L‑rhamnose和HAAs间连接合成鼠李糖脂。本发明的方法在实施过程中仅需短暂摇匀混合，可以解决鼠李糖脂发酵过程中大量起泡的问题，在鼠李糖脂生物合成领域具有广泛的应用前景。
胞外酶催化合成糖脂方法

[发明专利]利用黏细菌构建生物粘附固定化菌膜的方法及其应用-CN202210643367.X有效
发明人： 董维亮;刘婧媛;王彤;周小力;周杰 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2022-06-09 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明涉及利用黏细菌构建生物粘附固定化菌膜的方法及其应用，取待成膜菌株和粘细菌分别培养后，离心制成菌悬液；将待成膜菌株和粘细菌的菌悬液共同转接至成膜培养基培养，形成菌膜；所述成膜培养基为CYE培养基、CYE稀释培养基或MSM培养基；所述CYE稀释培养基为稀释50倍的CYE培养基。发明固定化菌膜采用了一种通过结合黏细菌建立生物粘附膜结构提高外源微生物菌群的降解效率和环境稳定性的新策略。降解菌群经过生物粘附成膜后，其对环境变化的耐受性显著提高，尤其是对酸性条件和高底物浓度环境的鲁棒性更强。生物膜结构为降解体系提供的保护，有助于建立多种微生物的共存关系，并起到保护和维稳结构的作用。
利用细菌构建生物粘附固定化菌膜方法及其应用

[发明专利]一种高产酸型槐糖脂的补料发酵方法-CN202110516282.0有效
发明人：钱秀娟;李顺;董维亮;刘仕勋;周杰;姜岷 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-05-12 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产酸型槐糖脂的补料发酵方法，将菌株进行二次活化培养后种子培养获得种子液，种子液接种至发酵培养基进行发酵培养，发酵培养基以酵母提取物为氮源，葡萄糖、菜籽油为碳源，无机盐组分为KH2PO4、Na2HPO4，CaCl2和MgSO4，葡萄糖、菜籽油初始浓度为30~90g/L；在发酵罐中加入发酵培养基，进行发酵反应；发酵反应时控制溶氧20%以上，补加葡萄糖维持浓度在30g/L以上；监控菜籽油浓度，在菜籽油浓度≤30g/L时补加60g菜籽油；发酵完成后，发酵液经高温处理后分离、纯化，得到槐糖脂。本发明的方法提高了底物的利用率与酸型槐糖脂的产率，且能够选择性地高产酸型槐糖脂，产物中酸型槐糖脂占比稳定在80%左右。
一种高产酸型槐糖脂发酵方法

[发明专利]一种化学生物法联用降解聚氨酯产生胺类单体的方法-CN202310749902.4在审
发明人： 董维亮;于长磊;刘嘉唯;姜岷;周杰 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-06-25 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12P13/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种化学生物法联用降解聚氨酯产生胺类单体的方法，包括以下步骤：(1)在催化剂作用下，聚氨酯和醇解剂进行醇解反应，得到醇解产物；(2)于缓冲溶液中，所得醇解产物经酯酶进行酶解反应，得到胺类单体；所述酯酶包括酯酶Aes72。本发明通过化学法和生物法联用降解聚氨酯，降低能耗的同时实现了TDA/MDA单体的制备，酶解后产生的单体可重新合成异氰酸酯，实现原料循环利用。
一种化学生物联用降解聚氨酯产生单体方法

[发明专利]一种从食品级乳酸链球菌素产品中提取高纯度乳酸链球菌素的方法-CN202310809865.1在审
发明人：吴昊;杨玉;姜岷;董维亮;周杰 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-07-04 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C07K14/315 文献下载
摘要：本发明公开了一种从食品级乳酸链球菌素产品中提取高纯度乳酸链球菌素的方法，包括以下步骤：(1)将食品级乳酸链球菌素产品溶解分离，得到沉淀和含盐上清液；(2)所得沉淀与稀酸溶液混合离心，得到溶解液；(3)将所得含盐上清液和/或溶解液在中空纤维膜组件中经以下工艺条件处理；i.微滤；ii.超滤脱蛋白；iii.超滤脱色，脱色结束后，对膜组件反洗；iv.超滤脱盐浓缩，对膜组件反洗；v.超滤纯化浓缩，对膜组件反洗；vi.真空浓缩干燥，得到乳酸链球菌素；上述反洗至少有一个步骤为通过微纳米气泡发生器进行反洗。本发明所提供的方法降低了产品的分离损失，为乳酸链球菌素在医药工业中的应用提供了保障。
一种食品级乳酸链球菌素产品提取纯度方法

[发明专利]一种工程菌株全细胞催化合成没食子酸的方法-CN202310869995.4在审
发明人：徐安明;熊洪达;周杰;董维亮;姜岷 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-07-17 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12P7/42 文献下载
摘要：本发明涉及一种工程菌株全细胞催化合成没食子酸的方法，包括：构建表达具核梭杆菌单宁酶的重组大肠杆菌基因工程菌；利用重组大肠杆菌基因工程菌全细胞催化底物合成没食子酸；其中，所述具核梭杆菌单宁酶的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的方法以新来源的单宁酶构建重组大肠杆菌基因工程菌作为没食子酸合成的全细胞催化剂，可在高温条件下催化单宁底物合成没食子酸，且以塔拉粉作为底物时37℃就有良好的催化合成效果，整体反应可在12h内达到平衡，并可利用高浓度底物获取高产量的没食子酸。
一种工程菌株细胞催化合成没食子酸方法

[发明专利]高催化活性和热稳定性的PLA解聚酶突变体及其应用-CN202310702144.0在审
发明人：周杰;谢彬;姜岷;白茸茸;董维亮 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-06-14 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开高催化活性和热稳定性的PLA解聚酶突变体及其应用。本发明利用理性设计以及定点突变技术，将SEQ ID NO：2所示PLA解聚酶氨基酸序列中第128、151、153、202、245、267、276位中的一个或多个氨基酸残基进行突变，获得了催化活性和热稳定性增强的突变体。这种PLA解聚酶突变体解决了现有技术中PLA解聚酶在高温环境下稳定性差的问题，可应用于酶工程领域中PLA塑料的酶法解聚。
催化活性热稳定性 pla 解聚突变体及其应用

[发明专利]一株高产β-榄香烯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用-CN202310710036.8在审
发明人：纪晓俊;李文娟;董维亮;买洁;张志刚;王凯峰;林璐 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-06-15 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明提供一株高产β‑榄香烯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用，属于生物工程领域。该重组解脂耶氏酵母菌，是在解脂耶氏酵母基因组中插入3‑羟基‑3‑甲基戊二酰CoA还原酶表达盒、法尼基焦磷酸合酶表达盒、异戊烯焦磷酸异构酶表达盒以及异源吉玛烯A合酶表达盒，并将解脂耶氏酵母菌中内源性ERG9启动子替换为麦角固醇抑制启动子pERG1或铜离子抑制启动子pCTR1后得到的。本发明重组解脂耶氏酵母，构建方法高效，操作简单，能够高产β‑榄香烯。
高产榄香烯重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法应用

[发明专利]一种提高涤纶废弃布料酶降解效率的预处理方法-CN202110211116.X有效
发明人：许斌;陈银萍;薛瑞;姜岷;周杰;董维亮 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-02-25 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12P7/44 文献下载
摘要：本发明公开一种提高涤纶废弃布料酶降解效率的预处理方法，包括：将洁净、干燥的涤纶废弃布料进行熔融；之后迅速进行降温淬火，使涤纶发生重结晶，降低结晶度；然后粉碎后加入到含有涤纶降解酶LCC的酶催化体系中，于pH=8，温度67℃条件下进行涤纶的酶降解。采用本发明的方法，能将涤纶废弃布料的结晶度从49%降低到约41%，能将原本不可直接酶降解的废弃涤纶的酶降解效率提高到50%。与现有的技术相比，本方法具有绿色无污染、经济高效、降解率大幅提高的特点。
一种提高涤纶废弃布料降解效率预处理方法

[发明专利]液滴微流控辅助的双鼠李糖脂高产菌株筛选方法-CN202111669695.9有效
发明人：徐安明;吴世磊;张晓晓;董维亮;周杰;姜岷 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C12N15/78 文献下载
摘要：本发明公开了液滴微流控辅助的双鼠李糖脂高产菌株筛选方法。分析鼠李糖脂合成的关键基因的转录水平和双鼠李糖脂产量的关系，选择转录水平和双鼠李糖脂产量正相关的关键基因作为荧光筛选标记，以荧光蛋白的信号强度表征该关键基因的转录水平，利用不同鼠李糖脂生产菌株胞内荧光蛋白信号强度的差异进行液滴微流控筛选，挑选出荧光强度高的备选菌株，通过鼠李糖脂发酵产物提取、鉴定和比较，最终从备选菌株中挑选性能优异的高产双鼠李糖脂的菌株。本发明建立的技术筛选精度高、通量大、特异性强、可定向筛选高产双鼠李糖脂的菌株。克服了目前CTAB‑MB平板筛选技术筛选效率低，且无法定向筛选高产双鼠李糖的瓶颈。
液滴微流控辅助双鼠李糖脂高产菌株筛选方法

[发明专利]聚氨酯降解酶特异性荧光探针、其制备方法及应用-CN202210703623.X有效
发明人：徐安明;董维亮;曹世祥;周杰;姜岷 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2022-06-21 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C07D519/00 文献下载
摘要：本发明涉及聚氨酯降解酶特异性荧光探针、其制备方法及应用。利用4,4’‑亚甲基双(异氰酸苯酯)与1,4’‑丁二醇合成聚氨酯骨架结构后，将荧光分子与3‑氨基丙酸反应得到带羧基的荧光分子，所述带羧基的荧光分子与合成的所述聚氨酯骨架结构上的羟基发生酯化反应，得到所述聚氨酯降解酶特异性荧光探针。本发明设计的探针对参与聚氨酯降解的酯酶具有高度选择特异性，可以有效避免其他非特异性酶的干扰。探针被菌株分泌的酯酶水解后具有荧光增强效应，利用菌株对荧光探针水解效果不同导致的荧光差异为筛选指标，进行液滴微流控分选，挑选出荧光强度高的菌株。
聚氨酯降解特异性荧光探针制备方法应用

[发明专利]一种基于表面活性剂调控的β-榄香烯双相发酵生产方法-CN202310219279.1在审
发明人：钱秀娟;董维亮;崔文星;张莉莉;林银山;姜岷 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-03-09 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C12P5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于表面活性剂调控的β‑榄香烯双相发酵生产方法，包括：取活化后的产天然产物β‑榄香烯的酵母菌菌种接种到合成培养基中培养得到种子液；将所述种子液接入合成培养基，使得初始OD为0.5~0.8，在28~30℃、180~240rpm条件下培养16~24h；之后加入萃取剂，再于28~30℃、180~240rpm条件下培养至72h；之后加入表面活性剂，继续培养至168~192h，收集有机相，即得。本发明通过优化表面活性剂的种类、添加量和添加时间，提高发酵系统中β‑榄香烯的生产效率，具有工艺简单，无环境污染物产生，适合于工业化生产的优点。
一种基于表面活性剂调控榄香烯双相发酵生产方法

[发明专利]负载酶复合物的可快速降解的抗菌材料及其制备方法-CN202310056738.9在审
发明人： 董维亮;范玲玲;逯建琦;姜岷 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-01-18 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： A61L31/16 文献下载
摘要：本发明公开一种负载酶复合物的可快速降解的抗菌材料的制备方法，包括：将四元随机杂化聚合物RHP、鼠李糖脂Rhl、洋葱伯克霍尔德菌脂酶BCL的酶液混合后孵育，获得聚合物修饰及鼠李糖脂保护的酶复合物；将所述酶复合物添加至聚己内酯甲苯溶液中混合均匀，室温下真空干燥，获得所述可快速降解的抗菌材料。本发明利用四元随机杂化聚合物以及鼠李糖脂协同修饰BCL，获得具有有机耐受性的酶复合物，将该酶复合物嵌在聚己内酯材料中，可得到具有抗菌性能的可快速生物降解的材料。该方法具有简单、操作容易以及成品率高等优点。
负载复合物快速降解抗菌材料及其制备方法

[发明专利]一株可降解微塑料的丛毛单胞菌及其构建方法和应用-CN202210947725.6在审
发明人： 董维亮;吴世磊;徐安明;周杰;姜岷 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2022-08-05 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一株可降解微塑料的丛毛单胞菌及其构建方法和应用。以DuraPETase为元件，以睾丸酮从毛单胞菌CNB‑1为底盘细胞，通过优化DuraPETase在CNB‑1中的表达及分泌情况，优化其对微塑料的降解能力，最终获得具有微塑料降解活性的人工菌株。该菌株在摇瓶培养中实现PET塑料薄膜和PET微塑料的降解。为PET微塑料的环境污染问题提供了一种新的解决方案。
一株可降解塑料丛毛单胞菌及其构建方法应用

[发明专利]一种评价聚氨酯降解的体系-CN202011415612.9有效
发明人： 董维亮;刘嘉唯;姜岷;何洁;周杰;许斌;徐安明 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2020-12-04 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明属于生物处理技术领域，具体公开了一种评价聚氨酯降解的体系，将降解聚氨酯菌的种子液接入含有聚氨酯的无机盐培养基中培养，降解聚氨酯，再通过质量损失、电镜扫描、红外光谱检测、凝胶色谱检测、浊度和降解产物鉴定中的任意一种或几种组合的方法来评价降解效果；其中，所述的聚氨酯为水性聚氨酯或聚氨酯薄膜。本发明建立了一种评价聚氨酯降解的体系，即对两种聚氨酯底物(PU模拟物Impranil DLN和PU薄膜)，通过微生物降解，基于物理表征的浊度变化、质量损失、表面降解情况等手段和基于化学表征的表面官能团变化、分子量变化、降解产物的鉴定等手段来评估聚氨酯底物的降解情况，从而能完整表征聚氨酯的降解效果。
一种评价聚氨酯降解体系

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