本发明公开了一种检测septin9基因甲基化的核酸组合及试剂盒,涉及分子生物学领域。本发明公开的检测septin9基因甲基化的核酸组合,包括septin9基因甲基化检测引物对,其包括碱基序列如SEQ ID NO.11所示的上游引物和SEQ ID NO.17所示的下游引物,该引物对可以特异性扩增septin9基因目的位点即septin9基因启动子区包含6个CpG位点的第三个CpG岛处,实现对septin9基因甲基化的特异性检测,且具有较高的灵敏度,检出限可低至100个拷贝,克服了ctDNA在血浆中含量低而导致无法检测的困难。
本发明公开了一种用于检测Y染色体微缺失的核酸组合及试剂盒和应用,涉及分子生物学领域。本发明公开的核酸组合包括第一引物组:SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2;第二引物组:SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4;第三引物组:SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6;第四引物组:SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8;第五引物组:SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10以及第六引物组:SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12。采用该核酸组合检测Y染色体微缺失,具有较高的灵敏度和较强的特异性。
本发明公开了AK2 V617F突变荧光定量PCR检测试剂盒和检测方法,包括有针对人JAK2 V617F的如SEQ ID NO.7‑SEQ ID NO.8所示的引物和如SEQ ID NO.13‑SEQ ID NO.14所示的探针。本发明设计的探针和引物,以及优化后的检测系统,具有非常好的特异性以及灵敏度。本发明利用等位基因突变引物不能有效扩增野生等位基因和等位基因野生TaqMan‑MGB探针对野生等位基因位点的特异性封闭作用来共同抑制野生等位基因扩增,从而建立了具有高灵敏度和特异性的JAK2 V617F突变率检测方法。